12 temel kurs - Kan Merkezleri ve Transfüzyon Derneği

Ulusal Kan Merkezleri ve Transfüzyon T›bb› Kursu XII - Temel Kurs
7- Tüplerin dibindeki eritrosit birikintileri tekrar yavaflça süspanse edilir ve makroskobik olarak aglütinasyon aç››ndan
incelenir.
8- Test sonuçlar› okunur, yorumlan›r ve kaydedilir. Eritrosit test sonuçlar› ABO reverse gruplama prensibi ile karfl›-
laflt›rarak do¤rulan›r (afla¤›ya bak›n›z).
Yorum
1- Test tüplerinin herhangi birindeki aglütinasyon sonucun pozitif oldu¤u anlam›na gelir.
2- Bir eritrosit birikintisinin resüspanse edilmesinden sonra süspansiyonun pürüzsüz olmas› negatif test sonucudur.
3- Kontrol tüpünde aglütinasyon görülmesi non-spesifik bir aglütinasyon olarak de¤erlendirilir ve otoantikorlar›n
varl›¤›n› gösterir.
4- De¤erlendirme Tablo 2’ye göre yap›l›r.
Teknik Uyar›lar
1- Zay›f veya negatif reaksiyon veren tüm antiserum-eritrosit kar›fl›mlar› mikroskobik olarak kontrol edilmelidir (bir
damla kar›fl›m lam-lamel aras› preparat haz›rlanarak mikroskobun küçük büyütme objektifinde incelenir).
2- Anti-A ve Anti-AB’de aglütinasyon fliddeti zay›f (+, ++) ise A subgruplar› araflt›r›lmal›d›r.
3- Temiz tüplere ilk önce antiserumlar damlat›lmal›d›r. Çünkü önceden eritrosit süspansiyonlar› damlat›lm›fl tüplerin
üzerine antiserum solüsyonlar›n›n damlat›lmas› s›ras›nda damlal›klar›n (dolay›s›yla antiserumlar›n) kontaminasyonu
söz konusu olabilir.
4- Sonuçlar›n de¤erlendirilmesi ikinci bir laboratuvar uygulay›c›s› taraf›ndan da yap›lmal›d›r. Bu flekilde çift de¤erlendirme
olas› yanl›fll›klar› çok azaltacakt›r.
Protokol 3: Tüp Testi ‹le Karfl›t Gruplama
Serolojik Yöntem: Hemaglütinasyon
Prensip: Karfl›t (Reverse) Gruplama (eritrosit yüzeyinde tafl›nmayan antijenlere karfl› serumdaki mevcut antikorlar›
gösterme)
Örnek: Hasta ya da ba¤›flç› serum veya plazma örne¤i kullan›l›r.
Araç-Gereç: A1, A2, B ve O grubu eritrositler. Bu hücreler haz›r ticari kitler fleklinde temin edilebilir ya da her gün
laboratuvarda grubu bilinen eritrositlerden % 2-5 süspansiyon haz›rlanarak elde edilir.
Prosedür
1- Test tüplerinin üzerine s›ras› ile A1, A2, B, O yaz›larak etiketlenir.
2- Her tüpe 2-3 damla hasta serumu damlat›l›r.
3- A1 etiketli tüpe bir damla A1 eritrosit süspansiyonu, A2 etiketli tüpe bir damla A2 eritrosit süspansiyonu, B etiketli
tüpe bir damla B eritrosit süspansiyonu, O etiketli tüpe bir damla O eritrosit süspansiyonu damlat›l›r (A2 ve
O eritrosit testleri tercihe ba¤l›d›r).
4- Tüp içerikleri yavaflça kar›flt›r›l›r ve yaklafl›k 900-1000 x g’de 15-30 sn. süreyle santrifüj edilir.
5- Tüpler hemoliz bulgusu aç›s›ndan incelenir. Eritrosit birikintileri tekrar yavaflça süspanse edilir ve aglütinasyon
aç›s›ndan incelenir.
6- Test sonuçlar› okunur, yorumlan›r ve kaydedilir. Serum test sonuçlar› ABO forward gruplama ile saptananlarla
karfl›laflt›rarak do¤rulan›r (yukar›ya bak›n›z).
7- Zay›f serum reaksiyonlar›n› güçlendirmek için tüpler 5-15 dak. boyunca oda ›s›s›nda inkübe edilir.
Yorum
Test tüplerinin herhangi birindeki aglütinasyon sonucun pozitif oldu¤u anlam›na gelir. Pozitif testlerde beklenen reaksiyonlar
+3 ile +4’tür .
Bir eritrosit birikintisinin resüspanse edilmesinden sonra süspansiyonun pürüzsüz olmas› negatif test sonucudur. De-
¤erlendirme Tablo 3’e göre yap›l›r.
- 65 -