Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung

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bachtet werden [121]. Durch den Marker werden unter Umständen die Proteinasen in
ihrer Funktionalität inhibiert.
4.2.2 Abbaukinetik von FITC – OVA in KMM∅ und DC
Für ein tiefergehendes Verständnis der Antigenprozessierung ist eine genaue Kenntnis
der Abbaukinetik von Proteinantigenen nötig. Da das endo-/ lysosomale System in sei-
nen Grundzügen gut verstanden ist, ist es möglich über eine Korrelation mit der Zeit den
Abbauort innerhalb des endo- / lysosomalen Systems zu bestimmen [125]. Sind Frag-
mente innerhalb von fünfzehn Minuten nachweisbar, so werden diese bereits in den frü-
hen Endosomen generiert. Bis zu einer Inkubationszeit von fünfzig Minuten entstehen
die Fragmente in den späten Endosomen. Bei längere Dauer sind die Fragmente
lysosomalen Ursprunges.
Wie die Experimente an KMM∅ zeigten, ist die Abbaukinetik von FITC – OVA abhängig
von deren Aktivierungsstadium. Vor allem LPS – stimulierte Makrophagen zeigten bei
Gabe von Proteinaseinhibitoren eine Veränderung der Abbau - Kinetik. Möglicherweise
werden durch die Proteinaseinhibitoren weitere, komplexe Vorgänge des endo-
/lysosomalen Systems beeinflusst. Da die beteiligten Gene jedoch weitgehend unbe-
kannt sind, gibt es in der Literatur hierzu keine weitere Information.
Gemeinsam ist allen Kinetikexperimenten an KMM∅ und DC´s, das nur zwei Abbaupro-
dukte von FITC – OVA nachweisbar sind. Ein Fragment mit 40 kD sowie ein 30 kD Ab-
bauprodukt, das jedoch erst später nachweisbar ist.
Die Makrophagen zeigen nach dreißig Minuten ein erstes Abbauprodukt. Dies weist dar-
aufhin, dass die Prozessierung von FITC – OVA in den späten Endosomen beginnt. Das
leichtere Fragment von 30 kD ist frühestens nach fünfzig Minuten nachweisbar. Die wei-
tere Prozessierung des FITC – OVA findet demnach in den Lysosomen statt. Auch andere
Studien zur Antigenprozessierung an B-Zellen zeigten, dass Abbaufragmente erst nach
längere Inkubation mit dem Antigen nachweisbar sind [167]. Hier wurde eine ähnliche
Abbaukinetik beobachtet. Auch Abbaustudien mit radioaktiv markierten Ovalbumin
zeigten eine vergleichbare Kinetik [168].
Ein Vergleich der Abbaukinetik in DC´s und Makrophagen zeigte nur geringe Unter-
schiede. So war bei den DC´s und der DC depletierten Restpopulation, die hauptsäch-