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Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung

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Material und Methoden Seite 60<br />

tungszeiten zwischen 0,5 und 2 Sekunden fotografiert. Zur Entwicklung wurden die Fil-<br />

me in <strong>der</strong> Dunkelkammer auf eine Entwicklungsspule gedreht und in eine Entwickler-<br />

dose gelegt. Anschließend wurde die Dose mit 250 ml Negativentwickler gefüllt, und es<br />

wurde für fünf Minuten unter gleichmäßigem Kippen <strong>der</strong> Dose entwickelt. Nach einer<br />

einminütigen Zwischenwässerung wurde fünf Minuten mit 250 ml Fixierer fixiert und<br />

dann 20 Minuten unter fließendem Wasser gewässert. Anschließend wurde <strong>der</strong> Film für<br />

eine Minute in ein Netzmittel gelegt. Nach Abstreifen wurde <strong>der</strong> Film an <strong>der</strong> Luft ge-<br />

trocknet.<br />

2.8.3 Anfertigung von Positivabzügen<br />

• Vergrößerungsgerät Durst M800<br />

• Fotopapier Ilfospeed 1.24 M1, Sem<strong>im</strong>att<br />

Ilfospeed 1.1 M1, Brilliant (Ilford Paramus)<br />

• Entwickler Eukobrom 1:9 (Tetanal)<br />

• Stoppbad 1,5% (v/v) Essigsäure<br />

• Fixierer Agefix 1:8 (Agfa)<br />

Der Negativfilm wurde in das Vergrößerungsgerät eingespannt. Negativaufnahmen für<br />

Fotomontagen wurden auf halbmattes, Endabzüge auf glänzendes Fotopapier bei Blende<br />

11 o<strong>der</strong> 16 und Belichtungszeiten von 15 bis 120 Sekunden projiziert. Danach wurde<br />

<strong>der</strong> Film eine Minute unter leichtem Schwenken in Eukobrom entwickelt. Die Entwick-<br />

lungsreaktion wurde <strong>im</strong> Essigsäurebad gestoppt, anschließend erfolgte eine zehnminüti-<br />

ge Fixierung in Agefix. Die Wässerung erfolgte für mindestens zehn Minuten unter flie-<br />

ßendem Wasser. Die Bil<strong>der</strong> wurden luftgetrocknet.<br />

2.9 Computerprogramme<br />

Alle verwendeten Computerprogramme lagen als Quellcode vor unter sind unter den Be-<br />

triebssystemen LINUX (Kernel 2.2.10) und z.T. unter Microsoft WINDOWS 98 lauffähig.<br />

Die Programme wurden mit Hilfe des EGCS- o<strong>der</strong> Microsoft VISUAL C++ Compiler in<br />

ausführbare Programme übersetzt. Die S<strong>im</strong>ulationen wurden auf einem AMD K7 / 500<br />

Rechner gefahren. Die verwendeten Programme lassen sich in vier Gruppen unterteilen:<br />

• Molecular Modelling Programme<br />

• Programme zur Strukturintegritätsprüfung<br />

• Visualisierungssoftware zur Darstellung <strong>der</strong> räumlichen Struktur<br />

• Sequenzalignment- und Darstellungsprogramme

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