Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung
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Material und Methoden Seite 60<br />
tungszeiten zwischen 0,5 und 2 Sekunden fotografiert. Zur Entwicklung wurden die Fil-<br />
me in <strong>der</strong> Dunkelkammer auf eine Entwicklungsspule gedreht und in eine Entwickler-<br />
dose gelegt. Anschließend wurde die Dose mit 250 ml Negativentwickler gefüllt, und es<br />
wurde für fünf Minuten unter gleichmäßigem Kippen <strong>der</strong> Dose entwickelt. Nach einer<br />
einminütigen Zwischenwässerung wurde fünf Minuten mit 250 ml Fixierer fixiert und<br />
dann 20 Minuten unter fließendem Wasser gewässert. Anschließend wurde <strong>der</strong> Film für<br />
eine Minute in ein Netzmittel gelegt. Nach Abstreifen wurde <strong>der</strong> Film an <strong>der</strong> Luft ge-<br />
trocknet.<br />
2.8.3 Anfertigung von Positivabzügen<br />
• Vergrößerungsgerät Durst M800<br />
• Fotopapier Ilfospeed 1.24 M1, Sem<strong>im</strong>att<br />
Ilfospeed 1.1 M1, Brilliant (Ilford Paramus)<br />
• Entwickler Eukobrom 1:9 (Tetanal)<br />
• Stoppbad 1,5% (v/v) Essigsäure<br />
• Fixierer Agefix 1:8 (Agfa)<br />
Der Negativfilm wurde in das Vergrößerungsgerät eingespannt. Negativaufnahmen für<br />
Fotomontagen wurden auf halbmattes, Endabzüge auf glänzendes Fotopapier bei Blende<br />
11 o<strong>der</strong> 16 und Belichtungszeiten von 15 bis 120 Sekunden projiziert. Danach wurde<br />
<strong>der</strong> Film eine Minute unter leichtem Schwenken in Eukobrom entwickelt. Die Entwick-<br />
lungsreaktion wurde <strong>im</strong> Essigsäurebad gestoppt, anschließend erfolgte eine zehnminüti-<br />
ge Fixierung in Agefix. Die Wässerung erfolgte für mindestens zehn Minuten unter flie-<br />
ßendem Wasser. Die Bil<strong>der</strong> wurden luftgetrocknet.<br />
2.9 Computerprogramme<br />
Alle verwendeten Computerprogramme lagen als Quellcode vor unter sind unter den Be-<br />
triebssystemen LINUX (Kernel 2.2.10) und z.T. unter Microsoft WINDOWS 98 lauffähig.<br />
Die Programme wurden mit Hilfe des EGCS- o<strong>der</strong> Microsoft VISUAL C++ Compiler in<br />
ausführbare Programme übersetzt. Die S<strong>im</strong>ulationen wurden auf einem AMD K7 / 500<br />
Rechner gefahren. Die verwendeten Programme lassen sich in vier Gruppen unterteilen:<br />
• Molecular Modelling Programme<br />
• Programme zur Strukturintegritätsprüfung<br />
• Visualisierungssoftware zur Darstellung <strong>der</strong> räumlichen Struktur<br />
• Sequenzalignment- und Darstellungsprogramme