Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung

Material und Methoden Seite 59
Bedingungen durchzuführen. Alle Primer wurden so gewählt, dass sie über eine GC –
Gehalt von 50% verfügten. Das Schaltprogramm für die Standard – PCR ist in Tab. 10b
aufgeführt. Von den erhaltenen PCR – Produkten wurden 10µl elektrophoretisch aufge-
trennt und durch Fluoreszenz nachgewiesen.
2.8 Fotodokumentation
Zur Dokumentation der Ergebnisse ist es nötig, von SDS- Gelen Positiv- Abzüge zu
erstellen. Ebenso sind die Röntgenfilme nach der Belichtung zu entwickeln. Alle
Schwarzweiß - Fotoarbeiten wurden im institutseigenen Fotolabor durchgeführt.
2.8.1 Entwicklung der Röntgenfilme
• Röntgenfilm Kodak X-OMAT ARS (Kodak)
Reflection NEF-486 (Du Pont)
• Entwickler Kodak LX 24, 1:5 (Kodak)
• Fixierer Kodak AL 4, 1:5 (Kodak)
Zur Entwicklung der Röntgenfilme wurden diese in einer Dunkelkammer drei Minuten in
der Entwicklerlösung unter Bewegung inkubiert, anschließend kurz in Wasser gelegt
und für zehn Minuten in der Fixierlösung fixiert. Danach wurden die Filme für mindes-
tens zehn Minuten gewässert und an der Luft getrocknet.
2.8.2 Herstellung und Entwicklung von Negativaufnahmen
• Negativfilm Agfaortho Professional (ISO 25)
Ilford Pan F (ISO 50)
• Reprokamera Leica MD-2
• Reproanlage Reprovit IIa (Leica)
• Leuchtbox Leitz
• Entwicklerdose Typ 1236 (Jobo)
• Negativentwickler Rodinal 1:25 (Agfa)
• Fixierer Agefix 1:8 (Agfa)
• Netzmittel Agepon 0,5% (Agfa)
Gele wurden im Durchlicht mit Blende 11 und Belichtungszeiten von 1/60, 1/30 und
1/15 sec aufgenommen. Montagen von Positivabzügen wurden im Auflicht mit Belich-