Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung
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Ergebnisse Seite 65<br />
3. Ergebnisse<br />
In dieser Arbeit wurden Abläufe <strong>der</strong> Antigen - <strong>Prozessierung</strong> und <strong>der</strong> nachfolgenden Pep-<br />
tid - Beladung von MHC - Klasse II Molekülen untersucht. Um frühe Vorgänge <strong>der</strong> Anti-<br />
gen - Präsentation aufzuklären, wurden drei verschiedene methodische Ansätze verfolgt.<br />
Mittels protein - biochemischer Untersuchungsmethoden wurde die <strong>Prozessierung</strong> des<br />
Modellantigens Ovalbumin in Makrophagen und Dendritischen Zellen aus Knochen-<br />
markskulturen untersucht. Durch die Edmann - Sequenzierung eines in den Zellen pro-<br />
teolytisch abgebauten Ovalbumin – Peptides wurden weitere Sequenz - Informationen<br />
über die Spaltstellen des Fragmentes gewonnen.<br />
Molekularbiologische Untersuchungen zeigten das Expressionsmuster verschiedener ly-<br />
sosomaler <strong>Protein</strong>asen in durch M-CSF generierten Knochenmarks - Makrophagen, die<br />
unterschiedlich st<strong>im</strong>uliert wurden.<br />
Durch biophysikalisch - theoretische Analysen wurden mechanistische Studien auf Mo-<br />
lekülebene durchgeführt, die Einblick in das potentielle Bindungsverhalten von Peptiden<br />
an MHC - Klasse II Molekülen ermöglichten. Durch die Einführung des Molecular Model-<br />
ling konnten diese Studien an MHC Klasse II - Molekülen <strong>der</strong> Ratte durchgeführt wer-<br />
den. Durch Konformationsvergleiche konnte ein potentieller DM - Wirkmechanismus auf<br />
molekularer Ebene diskutiert werden.<br />
Abb. 9 Schematische Darstellung <strong>der</strong> proteinchemischen Untersuchungen
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