Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

6 Synthese fluoreszenzmarkierter Phosphopeptide
6 Synthese fluoreszenzmarkierter Phosphopeptide
6.1 Darstellung von Phosphopeptiden
Prinzipiell gibt es zwei unterschiedliche Ansätze zur Darstellung phosphorylierter
Peptide, die globale Phosphorylierung der Peptide und den Einbau von bereits
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phosphorylierten Aminosäuren während der Peptidelongation.
Abb. 6.1 Globale Phosphorylierung: A) mit Phosphorchloridat B) mit Phosphoramidit.
Bei der globalen Phosphorylierung wird die Phosphatgruppe nach der
Peptidsynthese (post-synthetisch) durch Behandlung mit Phosphorylierungsrea-
genzien, wie zum Beispiel Phosphorchloridat 99 oder Phosphoramidit 103, eingeführt
(Abb. 6.1). Diese Methode bedarf keinerlei Veränderungen bei der Synthese des
Peptids. Für eine gezielte Phosphorylierung ist jedoch eine speziell abgestimmte
Schutzgruppenstrategie notwendig. Bedient man sich des Phosphorchloridats 99 als
Phosphorylierungsreagenz, so greifen unter basischen Bedingungen alle frei vor-
liegenden Hydroxylgruppen des Peptids am Phosphoratom von 99 an und man
gelangt zum Phosphorsäuretriester 100 (Abb. 6.1 A). Bei der Verwendung von
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