Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

6 Synthese fluoreszenzmarkierter Phosphopeptide
6.4 Synthese der beiden Peptide Y230 und pY230
Für die Synthese der beiden Peptide Y230 und pY230 wurde das Wang-Harz mit der
MSNT/MeIm-Methode [32] mit Fmoc-Asp(O t Bu)-OH beladen. Die Beladungsdichte
betrug 0,7 mmol/g.
Ausgehend von Fmoc-Asp(OtBu)-Wang-Harz erfolgte die automatisierte Synthese im
20 µmol Ansatz am Peptidsynthesizer (Abb. 6.6). Auch hier wurde der
Syntheseverlauf über die Abspaltung der Fmoc-Schutzgruppe mittels UV-Messung
verfolgt. Das UV-Monitoring der Synthese ist in Abb. 6.7 gezeigt. Die Synthese verlief
bei weitem nicht optimal. Es konnten zwei deutliche Einbrüche der Synthese
detektiert werden. Die Testabspaltung im Anschluss an die SPPS mit
darauffolgender RP-HPLC-offline-ESI-MS-Analyse bestätigte den Syntheseeinbruch.
Es wurde eine acetylierte Fragmentreihe der Peptidsequenz gefunden, die Fmoc-
geschützte vollständige Peptidsequenz 115 konnte nur in geringen Mengen erhalten
werden (Abb. 6.10).
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Abb. 6.6 Automatisierte Synthese des Peptids 115 am Peptidsynthesizer.