Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

4 Analytik
Der Vergleich verschiedener Matrices und Lösungsmitteln ergab, dass in unserem
Fall mit folgendem Protokoll zur Probenvorbereitung die besten Ergebnisse erzielt
werden konnten: Der Rückstand im Cap wird in Lösungsmittel A (0,1% TFA in
Wasser/Acetonitril (1:2)) aufgenommen. Anschließend wird die Probenlösung mit der
Matrixlösung (eine gesättigte Lösung aus vor Gebrauch umkristallisierter CHCA/DHB
(1:1) in Lösungsmittel A/Methanol (5:2)) auf dem MALDI-Target gemischt und der
Spot bei Raumtemperatur auskristallisiert.
Um sicher zu stellen, dass Peptide mit verschiedenen Sequenzen richtig unter-
schieden werden können, wurde ein weiteres Peptid 83 (Boc-cyclo[Lys-Ala-Gly-Pro-
Val-Glu]-βAla-Pro-Pro-Arg-Met-TG) analog zu 77 dargestellt. Die festphasen-
gebundenen Peptide 83 und 77 wurden zu gleichen Teilen gemischt und
anschließend einem partiellen Edman-Abbau unterworfen. Die Spektren in Abb. 4.16
zeigen, dass die Peptide erfolgreich sequenziert werden konnten. Somit haben wir
eine Methode zur Hand, die es uns ermöglicht, festphasengebundene cyclische
Peptide, welche als Hitsequenzen aus einer OBOC-Bibliothek hervorgehen, zu
sequenzieren. Eine Anwendung der Methode zur Sequenzanalyse von Hitsequenzen
wird im nächsten Kapitel ausführlich beschrieben.
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