Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

8 Experimenteller Teil
8.3.2 Synthese des cyclischen Peptids 31 zur Untersuchung von
Methionin als Sollbruchstelle
Die Synthese der Peptide erfolgte an SieberAmid-TentaGel (0,12 mmol/g). Die
linearen Vorläufersequenzen wurden am Peptidsynthesizer nach AAV 7 dargestellt.
Als chemistry file wurde 10µmol(3ml)2.1.0.kem ausgewählt. Die Elongation der
Peptidkette erfolgte unter Verwendung der Module HhDAFiiidD (PrPk Fmoc
Depro/Single). Die verwendeten Aminosäuren waren die folgenden: Fmoc-Ala-OH,
Fmoc-βAla-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Glu(OAll)-OH,
Fmoc-Met-OH, Fmoc-Phe-OH und Fmoc-Pro-OH.
Das Syntheseharz wurde vom reaction vessel des Synthesizers in eine
Einwegspritze mit PE-Fritte überführt. Die N-terminale Fmoc-Schutzgruppe wurde
nach AAV 10 gespalten. Zur Entschützung der mit Allyl geschützten Carbonsäure
wurde das Harz wie in AAV 11a beschrieben behandelt. Anschließend wurde wie in
AAV 8 aufgeführt cyclisiert.
Zur Analytik wurden kleine Mengen des Peptids entnommen und sauer nach AAV 17
gespalten.
Peptid 28
Fmoc-Met-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu(OAll)-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-NH2 (27→28)
Analytische RP-HPLC (Nucleosil Säule): (10-85% B° in 20 min, 1 ml/min)
RP-HPLC / tR ESI-MS gemessen [M+X] + berechnet
19,2 min 1644,5 m/z [M+H] + 1642,743 m/z (C81H108N15O18S2 + )
17,9 min 1660,4 m/z [M(ox.)+H] + 1658,738 m/z (C81H108N15O19S2 + )
Peptid 30
H-Met-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-NH2 (29→30)
Analytische RP-HPLC (Nucleosil Säule): (10-85% B° in 20 min, 1 ml/min)
RP-HPLC / tR ESI-MS gemessen [M+X] + berechnet
13,9 min 1380,9 m/z [M+H] + 1380,6439 m/z (C63H94N15O16S2 + )
13,4 min 1397,4 m/z [M(ox.)+H] + 1396,6388 m/z (C63H94N15O17S2 + )
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