Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

6 Synthese fluoreszenzmarkierter Phosphopeptide
mit anschließender RP-HPLC-offline-MS-Analyse durchgeführt (Abb. 6.10 unten).
Dabei wurde deutlich, dass auch in diesem Ansatz ein Teil als Abbruchsequenz
erhalten wurde. Der Anteil des gewünschten Peptids ist jedoch deutlich höher als
beim vollständig automatisierten Vorgehen. Der weitere manuelle Syntheseverlauf
erfolgte analog zu SRBS-Y241 und SRBS-pY241. Nach präparativer RP-HPLC
konnte das Peptid SRBS-Y230 in 6% Ausbeute erhalten werden. Da die erhaltene
Menge des Peptids für den Einsatz in den Mikroarray-Experimenten ausreichte,
wurde auf eine weitere Optimierung der Synthese verzichtet.
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Abb. 6.10 RP-HPLC-Chromatogramme im Vergleich (Detektion bei 214 nm). Das obere
Chromatogramm zeigt die Testabspaltung von 115, welches vollständig
automatisiert dargestellt wurde. Das untere Chromatogramm zeigt die
Testabspaltung von 121, das unter Verwendung von Pseudoprolin und nicht
vollständig automatisiert synthetisiert wurde.