Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

7 Zusammenfassung und Ausblick
Desweiteren wurde ein nicht-chemischer Ansatz verfolgt. Hierzu wurde das
rückgratcyclische Peptid 71 einem tryptischen Verdau unterworfen. Der Peptidzyklus
blieb von dieser Behandlung völlig unbeeinflusst, womit diese Methode ungeeignet
ist.
Abb. 7.4 Phenylisothiocyanat vermittelte Ringöffnung
Schließlich wurde die bereits in unserer Gruppe verwendete Phenylisothiocyanat
vermittelte Ringöffnung mit ins Konzept aufgenommen (Abb. 7.4). Hierzu wurden
Peptide verwendet, bei denen die Cyclisierung über die Seitenketten erfolgte, so
dass der N-Terminus frei zugänglich bleibt. Behandelt man solche Peptide mit den im
Edman-Abbau verwendeten Reagenzien, so erhält man ein lineares Peptid, welches
für die anschließende Sequenzierung zur Verfügung steht. Das N-terminal
gespaltene Phenylthiohydantoin-Derivat verbleibt über Seitenkettenverbrückung im
Peptid gebunden.
Die rein massenspektrometrischen ESI-MS(n)-Experimente an einem ESI-IT-
Massenspektrometer waren zunächst recht vielversprechend. Jedoch zeigte sich im
Verlauf der Arbeit, dass die Substanzmenge, welche auf einer einzelnen Harzkugel
gebunden vorliegt, nicht ausreicht, um zuverlässige und aussagekräftige Spektren zu
erhalten. Desweiteren stellte sich heraus, dass der Erfolg der Primärstrukturanalyse
stark sequenzabhängig ist.
Mit dem Einsatz des Partiellen Edman-Abbaus (PED) und dessen Kombination mit
chemischen Sollbruchstellen konnte eine Methode gefunden werden, die es erlaubt
cyclische Peptide ohne den Verlust des OBOC-Prinzips zu sequenzieren. Das
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