Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

3 Sollbruchstellen
3.2.1 Auswahl eines Linkers orthogonal zur Met-Sollbruchstelle
In den oben beschriebenen Experimenten wurde Methionin als Sollbruchstelle und
Linker verwendet. Somit wurde durch die Behandlung mit Bromcyan der Peptidzyklus
geöffnet und gleichzeitig das Peptid vom Harz gespalten. Soll die Bromcyan-
vermittelte Ringöffnung jedoch ohne simultane Abspaltung des Peptids vom Harz
erfolgen, benötigt man einen Linker, der allen verwendeten Bedingungen standhält.
Zur Darstellung des cyclischen Peptids werden folgende Bedingungen verwendet:
Die Standard-Bedingungen der Fmoc-SPPS (20% Piperidin in DMF bzw. NMP),
Entfernung der Allyl- bzw. Alloc-Schutzgruppe (Pd(0) und Nucleophil) und
Abspaltung der säurelabilen Boc-, Trt-, t-Bu- und Pbf-Schutzgruppen (95%TFA aq.).
Zum Öffnen des Peptidzyklus wird eine Bromcyan-Spaltung durchgeführt (BrCN in
70% TFA aq.). Außerdem sollen die festphasengebundenen cyclischen Peptide
einem Screening unterzogen werden (Abschnitt 5.3), welches im wässrigen Milieu
zwischen pH=1-9 verläuft; auch hierbei darf der Linker nicht reagieren. Da sich
herausstellte, dass der partielle Edman-Abbau die geeignetste Methode zur
Sequenzierung ist, muss der Linker schließlich auch zu diesen Bedingungen
kompatibel sein.
Peptid-Synthese
vor dem Screening
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Abb. 3.16 Ein geeigneter Linker muss zu allen hier aufgeführten Bedingungen
kompatibel sein.