Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

8 Experimenteller Teil
geladen. Das mit Harz befüllte 8 ml Reaktionsgefäß wird eingespannt und die
Synthese wird gestartet.
UV-Monitoring des Syntheseverlaufs
Zur Entfernung der Fmoc-Schutzgruppe wird das Harz je 8 min mit einer 20%
Piperidin in NMP-Abspaltlösung behandelt. Von der Abspaltlösung erfolgt eine
Absorptionsmessung bei 301 nm. Ist die Abweichung der Absorption größer 4% der
vorherigen Messung, so erfolgt ein erneuter Fmoc-Abspaltschritt. Es erfolgen jedoch
maximal sechs Fmoc-Abspaltschritte. Für jeden Aminosäurekupplungschritt werden
6,25 eq. Aminosäure mit 4,75 eq. HBTU/HOBt und 10 eq. DIPEA aktiviert und 40 min
gekuppelt. Zum Capping wird das Harz 1 min mit Cappinglösung behandelt. Waren
zur vorherigen Fmoc-Abspaltung mehr als drei Piperidinbehandlungsschritte
notwendig, so wird die Reaktionszeit beim Capping um 5 min verlängert.
Nach der Synthese wird das Harz in eine mit einer Fritte versehene Einwegspritze
umgefüllt.
Leitfähigkeitsmessung zum Überprüfen des Syntheseverlaufs
Die Synthese erfolgt analog zum oben beschriebenen Verlauf (UV-Monitoring).
Jedoch wird von der Fmoc-Abspaltlösung anstelle einer Absorptionsmessung die
Leitfähigkeitsmessung durchgeführt. Bei der PreviousPeak-Methode wird die Fmoc-
Abspaltung solange wiederholt, bis sich die Leitfähigkeitswerte zweier aufeinander
folgender Messungen um weniger als 5% unterscheiden. Bei Verwendung der
FirstPeak-Methode wird immer der Messwert der ersten Abspaltung als
Vergleichswert herangezogen.
AAV 8 Cyclisierung
Zum in NMP vorgequollenen Harz wird eine Mischung aus 4 eq. PyBOP, 6 eq. HOBt
und 8 eq. DIPEA in NMP aufgezogen und über Nacht geschüttelt. Anschließend wird
zehnmal mit DMF und fünfmal mit DCM gewaschen. Die Vollständigkeit der
Cyclisierung wird mit Kaiser- und TNBS-Test überprüft. Die Cyclisierungsreaktion
wird bis zur Vollständigkeit wiederholt, wobei die Aktivierungsreagenzien täglich
erneuert wurden. Nach erfolgreicher Cyclisierung wird das Harz im Vakuum
getrocknet. Die Cyclisierung mit PyAOP/HOAt erfolgt analog.
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