Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

8 Experimenteller Teil
8.3.7 Synthese des festphasengebundenen Peptids 77 als
Modellpeptid zur Etablierung des Partiellen Edman-Abbaus
(PED)
Standard aminofunktionalisiertes TentaGel wurde nach AAV 1 mit Fmoc-Met-OH
beladen. Es ergab sich eine Beladungsdichte von 0,112 mmol/g. Die Festphasen-
synthese des Peptids erfolgte am Peptidsynthesizer nach AAV 7. Mon20µM
(3mlRV).kem wurde als chemistry file ausgewählt. Für den ersten Zyklus wurde
Modul D (NMP Wash) verwendet. Zyklus zwei bis zwölf verlief mit der Modulfolge
HhDAFiidD (PrPk Fmoc Depro/Singel) und als abschließender Zyklus folgte Modul c
(Final DCM Wash). Folgende Aminosäurebausteine wurden verwendet: Fmoc-Ala-
OH, Fmoc-βAla-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Glu(OAll)-OH, Fmoc-
Phe-OH, Fmoc-Pro-OH und Boc-Lys(Alloc)-OH. Nach der automatisierten SPPS
erfolgte die Abspaltung der Alloc- und Allyl-Schutzgruppen (AAV 11a) und schließlich
die Cyclisierung mit PyBOP nach AAV 8.
Zur Analytik wurden kleine Mengen des Peptids entnommen und mit BrCN nach AAV
14 gespalten.
H-Lys(Alloc)-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu(OAll)-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Hsl (75→76)
Analytische RP-HPLC (Nucleosil-Säule): (10-85% B° in 20 min, 0,1 ml/min)
RP-HPLC / tR ESI-MS gemessen [M+X] + berechnet
17,8 min 1571,3 m/z [M+H] + 1571,7563 m/z (C74H104N16O20S + )
15,9 min 1531,2 m/z [(M-All)+H] + 1531,7250 m/z (C71H103N16O20S2 + )
H-Lys-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Hsl
Analytische RP-HPLC (Nucleosil-Säule): (10-85% B° in 20 min) tR = 15,6 min
ESI-MS: 1462,6 m/z
Berechnet: C68H101N16O18S + (1461,7195 m/z)
H-cyclo[Lys-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu]-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Hsl (77→78)
Analytische RP-HPLC (Nucleosil-Säule): (10-85% B° in 20 min) tR = 15,0 min
MALDI-TOF-MS: 1444,7 m/z
Berechnet: C68H99N16O17S + (1443,7089 m/z)
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