Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

3 Sollbruchstellen
Abb. 3.7 RP-HPLC-Diagramm nach einer Testabspaltung des photolabilen cyclischen
Peptids 10 mit 1% TFA. Unter diesen Bedingungen bleibt die Boc-
Schutzgruppe weitestgehend im Peptid erhalten. Deutlich zu erkennen sind
zwei Produktpeaks pro Peptid.
Säule: C-18 Nuclosil 100-5, 4x25 mm; Flussrate = 1 ml/min. Die gewählte
Detektorwellenlänge ist 254 nm. Gradienten: 10-85% MeCN in 20 min. Beiden
Eluenten (Wasser und MeCN) wurde je 0.1% TFA zugesetzt.
Abb. 3.7 zeigt das Chromatogramm eines analytischen RP-HPLC-Laufes nach einer
Testabspaltung des Peptids 10. Unter den bei der Testabspaltung verwendeten
Standard-SieberAmid-Abspaltbedingungen (TFA/TIS/DCM (1:1:98)) bleibt die Boc-
Schutzgruppe weitestgehend auf der Aminogruppe der Lysinseitenkette erhalten. Die
quantitative Abspaltung des Peptids vom Harz erfolgte durch Behandlung mit
TFA/TIS/DCM (95:2,5:2,5), wodurch simultan die Boc-Schutzgruppe entfernt wurde.
Mittels präparativer RP-HPLC wurden die beiden Komponenten voneinander
getrennt. Zur NMR-spektroskopischen Untersuchung wurden von beiden Produkten
COSY-, HSQC-, TOCSY- und ROESY-Experimente durchgeführt. Die Durchführung
eines NOESY-Experiments ist für diese Verbindung nicht sinnvoll, da die Intensität
der erhalten Signale von der molaren Masse abhängt und bei ca. 1000 g/mol gegen
Null geht. Die vollständige Auswertung der erhaltenen Datensätze bestätigt, dass es
sich um zwei cyclische Peptide der gleichen Sequenz mit vermutlich
unterschiedlicher Konfiguration handelt. Abb. 3.8 zeigt exemplarisch einen Ausschnitt
aus einem ROESY-Spektrum, aus dem die Sequenz ausgelesen werden kann. Alle
weiteren NMR-Daten können dem Anhang entnommen werden.
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