Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

4 Analytik
Abb. 4.11 MALDI-TOF Massenspektrum der durch partiellen Edman-Abbau erzeugten
Peptidleiter des Modellpeptids 77. Aus den Differenzen der Signale kann die
Peptidsequenz ausgelesen werden.
Der Zyklus wurde so oft wiederholt, bis alle variablen Positionen (deren Anzahl ist
aus der Split-Mix-Synthese bekannt) abgebaut und dadurch die Peptidleiter erzeugt
wurde. Der letzten TFA-Behandlung folgte eine ausgiebige Waschprozedur mit
Dichlormethan, Pyridin und nochmals Dichlormethan. Um den spurlosen Abbau zu
verwirklichen, wurde schließlich das Fmoc-Capping durch Behandlung des Harzes
mit 20% Piperidin in DMF aufgehoben. Zur Abspaltung der Peptidleiter vom Harz
wurde dieses über Nacht mit einer Lösung aus BrCN in 70% TFA aq. behandelt. Das
anschließend erhaltene MALDI-TOF-Massenspektrum der Peptidleiter ist in Abb.
4.11 zu sehen. Aus dem Spektrum kann die vollständige Sequenzinformation
ausgelesen werden. Vergleicht man jedoch die gemessenen m/z-Werte mit den
theoretisch errechneten Werten der Peptidleiter, so fällt auf, dass diese um minus
16 m/z verschoben erhalten wurden. Erst nach dem Abspalten des seitenketten-
verbrückten Glutaminsäure-Lysin-PTH-Derivats stimmen die errechneten und die
ermittelten Massen überein. Diese Beobachtung lässt auf eine Modifikation des im
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