Vol.XXXVII, Suppl. 1 - Giornale Italiano di Ortopedia e Traumatologia

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citi autologhi e trapianto di cellule mesenchimali di derivazione
ossea). Le tecniche rigenerative, inizialmente con il
trapianto di condrociti autologhi (TCA) e recentemente con
il trapianto di cellule mononucleate midollari (TCMM) hanno
ricevuto un notevole impulso dallo sviluppo di scaffold riassorbibili.
Infatti la struttura tridimensionale dello scaffold,
consentendo la semina cellulare direttamente sul biomateriale,
evita la necessità di procedure indaginose, come
ad esempio il prelievo e la sutura del periostio (tecnica di
Peterson). Inoltre lo scaffold per la sua maneggevolezza e
per le sue caratteristiche autoadesive permette nella grande
maggioranza dei casi una chirurgia di tipo artroscopico.
Scopo di questo lavoro è quello di descrivere la nostra
esperienza con l’uso di uno scaffold in acido ialuronico
per la riparazione delle lesioni cartilaginee di ginocchio
e caviglia.
EspEriEnZa cLinica con hyaLograft-c
L’esperienza clinica della Clinica II IOR con lo scaffold in
acido ialuronico è iniziata nel 2001 con l’introduzione
dello Hyalograft-C nella pratica clinica. Questo biomateriale
ha permesso lo sviluppo di una metodica interamente
artroscopica per il trattamento delle lesioni osteocondrali
della caviglia 1 e del ginocchio 2 .
Il biomateriale utilizzato per lo Hyalograft-C è un derivato
esterifi cato dell’acido ialuronico denominato Hyaff-11 (FI-
DIA Advanced Biopolymers, Abano Terme, Italia).
L’acido ialuronico è un polisaccaride lineare costituito da
sequenze ripetute di acido glucuronico e N-acetil–glucosamina.
Esercita importanti funzioni biologiche collegate alle
sue proprietà chimico-fi siche e può interagire con differenti
tipi cellulari attraverso recettori di membrana. È stato dimostrato
che l’acido ialuronico gioca un ruolo fondamentale
in molti processi biologici quali l’idratazione dei tessuti,
l’organizzazione dei proteoglicani, lo sviluppo embrionale,
il differenziamento e la migrazione cellulare.
In particolare, nel caso di trapianto di condrociti, lo Hyaff-
11 si è rivelato essere un carrier idoneo alla proliferazione
ed al mantenimento del fenotipo condrocitario delle
cellule da esso veicolate.
Tramite indagini a livello molecolare si è visto infatti come
i condrociti umani isolati da cartilagine sana di pazienti
donatori, espansi in coltura monostrato, seminati sulla matrice
tridimensionale Hyaff-11 e processati a diversi tempi
sperimentali, riesprimano i messaggeri per il collagene
di tipo II e per i proteoglicani (marcatori comunemente
accettati del fenotipo condrocitario).
Tali cellule sono in grado inoltre di produrre il collagene II
come evidenziato da analisi immunoistochimiche e di Western
blotting. Immagini ultrastrutturali eseguite con microscopia
FEISEM (Field Emission In Lens Scanning Electron
Microscopy) hanno mostrato come la colonizzazione di
tale materiale da parte dei condrociti si completi nell’arco
r. Buda Et aL.
di due settimane secondo una progressione continua.
Inoltre le modifi cazioni osservate nelle cellule condrocitarie
coltivate su Hyaff-11 indicano che la cellula va in contro
a processi neo-differenziativi. Questi processi, dopo
la dedifferenziazione legata al prelievo da donatore ed
alla messa in coltura, sembrano legati principalmente alla
interazione, dopo un periodo di circa due settimane dalla
semina, con il substrato biotecnologico. Il risultato di queste
modifi cazioni ha come prodotto una stabilizzazione
della struttura del complesso Hyaff-11/condrociti rendendolo
idoneo all’impianto.
tEcnica chirurgica
hyalograft-c nella caviglia
Il trattamento è costituito da due sedute chirurgiche. Nel corso
della prima, si esegue un’artroscopia di caviglia mediante
accessi antero-mediale ed antero-laterale. La sede di lesione
viene identifi cata ed esaminata, analogamente allo stato
della cartilagine circostante e della opposta superfi cie articolare.
Si esegue una bonifi ca del tessuto patologico fi no al
raggiungimento di un letto osseo sano. In caso di presenza
di frammento osteo-condrale distaccato è possibile utilizzare
questo per prelevare i condrociti per la coltura cellulare 3 . In
alternativa è possibile prelevare un campione di tessuto condrale
sano dai margini della lesione o dal margine anteriore
del plafond tibiale. Il tessuto condrale viene poi inviato al
laboratorio specializzato, in cui si esegue la coltura cellulare
e la semina sulla membrana di acido ialuronico.
Per l’impianto del biomateriale, si esegue una seconda artroscopia
di caviglia a distanza di circa 6 settimane dalla
data del prelievo, utilizzando uno strumentario specifi camente
ideato (Citieffe, Calderara di Reno, Bologna) 1 . Per
via artroscopica, attraverso gli stessi accessi chirurgici
del precedente intervento si raggiunge la lesione, la si
bonifi ca accuratamente e la si misura con l’ausilio di un
palpatore millimetrato. Qualora la profondità della lesione
risulti superiore a 5 mm è consigliabile eseguire
il borraggio della stessa con osso spongioso, prelevato
generalmente a livello della metafi si prossimale della tibia
omolaterale. La membrana caricata con condrociti autologhi
viene quindi tagliata con appositi stampini seguendo
le dimensioni rilevate (Fig. 1), quindi alloggiata all’estremità
di un posizionatore a slitta (Fig. 2). Questo viene
inserito all’interno di una cannula metallica fenestrata di
8 mm di diametro e 111 mm di lunghezza, avente lo
scopo di veicolare la membrana direttamente a livello del
sito di lesione (Fig. 3). La progressione del biomateriale
può facilmente essere controllata mediante l’apertura
sulla cannula. Una volta che lo scaffold ha raggiunto la
sede di lesione, si rimuove la cannula e si perfeziona l’alloggiamento
mediante palpatore o spatola piatta (Fig. 4).
Infi ne si verifi ca la stabilità del biomateriale effettuando
multiple fl esso-estensioni della caviglia.