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propiedades estructurales y funcionales de preparados proteicos de ...

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2.1.5. Solubilidad<br />

Capítulo2: Hidrólisis enzimática <strong>de</strong> aislados <strong>proteicos</strong> <strong>de</strong> amaranto<br />

Se realizaron medidas <strong>de</strong> solubilidad en las soluciones buffer <strong>de</strong> diferente pH<br />

(2,0; 4,0; 6,3 y 8,0). Se suspendieron las muestras <strong>de</strong> manera que la concentración<br />

<strong>de</strong> proteína fuese <strong>de</strong> 1 mg/ml y se procedió <strong>de</strong> igual forma que en la sección 1.1.5.<br />

2.1.6. Cromatografía rápida <strong>de</strong> proteínas en medio líquido<br />

(FPLC)<br />

Las cromatografías FPLC se realizaron <strong>de</strong> la manera explicada en la sección<br />

1.1.8.3. pero utilizando buffers <strong>de</strong> pH 2,0; 6,3 y 8,0 para la solubilización y<br />

elución <strong>de</strong> las proteínas en la corrida cromatográfica.<br />

2.1.7. Electroforesis<br />

Se realizaron SDS-PAGE <strong>de</strong> todas las muestras en condiciones reductoras<br />

(sección 1.1.6.).<br />

2.1.8. Curvas <strong>de</strong> tensión superficial en la balanza <strong>de</strong><br />

Langmuir<br />

La balanza <strong>de</strong> Langmuir es una adaptación <strong>de</strong> la lámina o placa <strong>de</strong> Wilhelmy y<br />

permite medir la tensión superficial en la interfase aire/agua que va a <strong>de</strong>pen<strong>de</strong>r<br />

<strong>de</strong> la presencia <strong>de</strong> moléculas o partículas tensioactivas en la interfase.<br />

2.1.8.1. Placa <strong>de</strong> Wilhelmy<br />

Cuando una lámina <strong>de</strong>lgada es sumergida en un líquido, la tensión superficial se<br />

manifiesta por un menisco que se forma a lo largo <strong>de</strong> su perímetro.<br />

El equilibrio <strong>de</strong> fuerzas verticales muestra que el peso, w, <strong>de</strong>l menisco soportado<br />

por la lámina es igual a la fuerza aportada por la superficie. Esta fuerza es igual a<br />

la componente vertical <strong>de</strong> la tensión superficial, γ × cos θ, don<strong>de</strong> θ es el ángulo<br />

<strong>de</strong> contacto con la placa, multiplicado por el perímetro <strong>de</strong> la placa p, entonces:<br />

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