propiedades estructurales y funcionales de preparados proteicos de ...

2.2.1.2. Cromatografías FPLC
Capítulo2: Hidrólisis enzimática de aislados proteicos de amaranto
Según lo revelado por la cromatografía de exclusión molecular (Figura 2.7.), las
fracciones solubles en los diferentes buffers difirieron en la distribución de
tamaños moleculares. A pH 8,0 la fracción soluble de AI (figura 2.7. (a)) muestra
la presencia de polímeros de globulina-P (componente I en la figura, con masas
moleculares que varían entre 500 y 300 KDa), moléculas de globulina-P y 11S de
280 ± 7 kDa (componente II), que fueron descriptos por Martínez, Castellani y
col., (1997) y especies de masas moleculares menores a 100 kDa (componente III)
perteneciente a las albúminas. Las fracciones solubles de hidrolizados de alcalasa
(AH1.7 y AH9.5) no mostraron agregados de alto peso molecular, pero si una
mayor proporción de especies monoméricas y polipéptidos de bajo peso
molecular resultantes de la hidrólisis. En AH9.5 a pH 8,0 se puede observar la
inversión de los picos que eluyen aproximadamente a 22 ml mostrando un
cambio hacia menores valores moleculares debido a la hidrólisis. Los
hidrolizados con tripsina mostraron no sólo componentes de bajo peso
molecular, sino también agregados solubles, aunque en una proporción mucho
menor que la encontrada en el aislado sin hidrolizar, AI, exhibiendo además
pesos moleculares intermedios (que corresponden a masas moleculares 68 a
14 kDa). Las especies que se encuentran en la fracción soluble a pH 6,3 fueron
similares a las detectadas a pH 8,0 con la diferencia que presentaron algo menos
de especies de alto peso molecular, especialmente en AI. A pH 2,0 las especies
que se observaron fueron polipéptidos de baja masa molecular, incluso en AI.
Esto se debería a reacciones de disociación de los polipéptidos, además de la
hidrólisis que se produce a pH 2,0
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