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propiedades estructurales y funcionales de preparados proteicos de ...

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Capítulo 1: Tratamiento ácido <strong>de</strong> aislados <strong>de</strong> soja y amaranto<br />

una superficie plana para eliminar los restos <strong>de</strong> hexano. La harina se almacenó a<br />

4 °C hasta su utilización.<br />

El aislado proteico <strong>de</strong> soja (SN) fue obtenido según el método <strong>de</strong>scripto por<br />

Petrucelli y Añón (Petruccelli y Añón 1995). La harina <strong>de</strong> soja <strong>de</strong>sgrasada fue<br />

suspendida en agua en una concentración <strong>de</strong> 10 g <strong>de</strong> harina por cada 100 ml <strong>de</strong><br />

agua, se llevó el pH <strong>de</strong> la suspensión a 8,0 con NaOH 2 N bajo una agitación<br />

intensa y se lo mantuvo durante 1 h controlando el pH regularmente.<br />

Transcurrido ese tiempo se centrifugó 30 min a 10000 g a una temperatura <strong>de</strong><br />

4 °C. Se separó el sobrenadante, se lo llevó a pH 4,5 con una solución <strong>de</strong> HCl 2 N<br />

para precipitar proteínas manteniéndolo durante 10 min bajo agitación y luego se<br />

centrifugó 20 min a 10000 g y 4 °C. Se separó el precipitado <strong>de</strong> proteínas y se lo<br />

suspendió en agua llevando el pH a 7,0 con NaOH 2N. Luego se congeló la<br />

suspensión y se liofilizó. El liofilizado se molió con mortero y se guardó<br />

herméticamente a 4 °C hasta su utilización.<br />

El aislado proteico <strong>de</strong> amaranto (AN) se preparó <strong>de</strong> acuerdo el método <strong>de</strong>scripto<br />

por Martínez y Añón (Martínez y Añón 1996). Se suspendió la harina <strong>de</strong>sgrasada<br />

en agua (10 g / 100 ml), se llevó a pH 9,0 con NaOH 2 N, se agitó la suspensión 1<br />

h, se centrifugó a 4 °C por 20 min a 9000 g y el sobrenadante fue ajustado a pH<br />

5,0 con HCl 2 N. Luego se lo centrifugó 20 min a 9000 g a 4 °C, se lo suspendió en<br />

agua y se lo neutralizó con NaOH 0,1 N. Para su conservación se utilizaron las<br />

condiciones <strong>de</strong>scriptas para el aislado <strong>de</strong> soja.<br />

1.1.2. Caracterización química <strong>de</strong> los aislados<br />

Una vez obtenidos los aislados, se <strong>de</strong>terminó su composición química.<br />

El contenido proteico se <strong>de</strong>terminó mediante el método <strong>de</strong> Kjeldahl (Kjeldahl<br />

1883) utilizando un factor <strong>de</strong> N × 5,85 (Becker, Wheeler y col. 1981; Scilingo,<br />

Molina Ortiz y col. 2002). Para SN se obtuvo un 85,2 % ± 0,3 y para AN 83,1 % ±<br />

0,5 <strong>de</strong> proteínas, ambos valores expresados en porcentaje p/p en base seca.<br />

El contenido <strong>de</strong> humedad se <strong>de</strong>terminó en forma indirecta por secado en estufa a<br />

105 °C hasta peso constante. La humedad <strong>de</strong> SN fue <strong>de</strong> 10,5 % ± 0,2 mientras que<br />

AN presentó un valor <strong>de</strong> 10,7 % ± 0,3.<br />

El contenido <strong>de</strong> cenizas se <strong>de</strong>terminó por pesada calcinando en mufla a 550 °C<br />

hasta la obtención <strong>de</strong> cenizas blancas. El contenido <strong>de</strong> cenizas fue <strong>de</strong> 3,6 % ± 0,1 y<br />

2,7 % ± 0,1 para SN y AN, respectivamente.<br />

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