propiedades estructurales y funcionales de preparados proteicos de ...

Capítulo 1: Tratamiento ácido de aislados de soja y amaranto
bien definidos a 70,1 y 98,6 °C. El desplazamiento de las temperaturas de los
picos de desnaturalización a mayores valores con el aumento de la fuerza iónica
podría atribuirse a la presencia de sales en el medio que compiten por el agua
con las proteínas. Esta competencia resulta en una menor cantidad de agua
disponible para atacar los sitios susceptibles a la ruptura de enlaces, en
consecuencia para igual gradiente de aumento de temperatura se requiere mayor
temperatura para producir desnaturalización.
1.2.1.2. Electroforesis y cromatografías de exclusión molecular FPLC
1.2.1.2.1. Determinación de tamaños moleculares de especies nativas
Las corridas SDS-PAGE en condiciones reductoras y no reductoras
correspondientes a las proteínas de SN y AN mostraron los siguientes perfiles
(Figura 1.9.).
En ausencia de 2-ME (Figura 1.9.(a)) el perfil SN muestra la presencia de
agregados proteicos que no entran al gel, agregados solubles de más de 100 kDa,
los polipéptidos α’ (76 ± 4 kDa), α (67 ± 3 kDa) y β (48 ± 4 kDa) pertenecientes a
la globulina 7S o β-conglicinina, la subunidad AB (51 ± 4 kDa) de la globulina 11S
o glicinina y polipéptidos de menor masa molecular en particular los
polipéptidos A (30-34 ± 3 kDa) y B (21 ± 2 kDa) de 11S que se encuentran libres.
En el perfil correspondiente a AN se observan tres bandas con pesos moleculares
de 56 ± 4, 51 ± 3 y 47 ± 3 kDa correspondientes a las globulinas 11S, P y 7S, más
abajo dos bandas de 30 ± 1 y 28 ± 1 kDa correspondientes a polipéptidos de la
fracción albúminas y/o a los polipéptidos A de las globulinas 11S y P; y en la
parte inferior del perfil bandas de 16 ± 1, 13 ± 1, 10 y 8 kDa, todas ellas
pertenecientes a polipéptidos de la fracción albúminas. Se puede observar
además una banda muy tenue alrededor de 20 ± 1 kDa y que correspondería a
los polipéptidos B de las globulinas 11S y P.
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