propiedades estructurales y funcionales de preparados proteicos de ...

Capítulo 1: Tratamiento ácido de aislados de soja y amaranto
las albúminas. Esto probablemente podría deberse a una difusión de dichos
polipéptidos al medio cuando el gel fue sumergido en el buffer de tratamiento
(sección 1.1.6.6.).
SN, AN y una mezcla que contiene cantidades iguales de ambos aislados (MN)
suspendidas en buffer A, fueron separados mediante cromatografías de
exclusión molecular. Las fracciones colectadas de los diferentes picos de los
cromatogramas fueron analizadas mediante SDS-PAGE en condiciones
reductoras para identificar las especies proteicas que contribuían a cada uno de
ellos. Los resultados obtenidos se muestran en la Figura 1.11. (a), (b) y (c). En el
caso de SN (Figura 1.11.(a)) los picos indicados como 1, 2, 3 y 4 están compuestos
principalmente por polipéptidos pertenecientes a las globulinas 7 y 11S. En el
pico número 5, que muestra valores de absorbancia mayores, se puede observar
la presencia muy tenue del polipéptido β de β-conglicinina (7S) y de los
polipéptidos A y B de la glicinina (11S). En las calles correspondientes a los picos
7 y 8 se detectó principalmente el polipéptido B de 11S. Las calles 9, 10 y 11 no
presentaron bandas, ello puede ser debido al hecho que el tamaño molecular de
las especies presentes sea demasiado pequeño para ser retenidas en el gel y/o que
la concentración proteica fue muy baja como para ser detectada. En el caso de
AN (Figura 1.11.(b)) al primer pico del cromatograma contribuyen polipéptidos
pertenecientes a las globulinas P y 11S. A partir del pico número 2 se comienza a
observar la banda L de 43 kDa perteneciente a la proteína minoritaria 7S de
amaranto, que se ve más definida en la calle del gel correspondiente al pico 3.
También a este pico contribuyen polipéptidos de peso molecular menor a 20 kDa
pertenecientes a la fracción albúminas. En el pico 4 aparecen sólo albúminas de
bajo peso molecular y el polipéptido B2 perteneciente a la globulina 11S mientras
que en los picos 5 y 6, que constituyen los picos mayoritarios del cromatograma
en términos de absorbancia a 280 nm, se detectan albúminas de masa molecular
cada vez más pequeña. Las especies proteicas que se separan en los picos 7 y 8 no
pudieron identificarse en las electroforesis probablemente por las razones
indicadas previamente. El perfil electroforético de MN (Figura 1.11.(c)) es
intermedio entre los cromatogramas de SN y AN. Se puede ver en las
electroforesis que los primeros picos corresponden a las globulinas de soja y en
menor medida a las de amaranto. En los picos 4 y 5 se detectan principalmente
11S de soja y globulinas de amaranto. En el pico 6 se observan tenuemente
polipéptidos de tipo B correspondientes a la 11S de soja y de amaranto mientras
que al pico 7 contribuyen albúminas de amaranto. Los picos 8 y 9 no quedan
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