propiedades estructurales y funcionales de preparados proteicos de ...
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1.1.15. Microscopía óptica<br />
Capítulo 1: Tratamiento ácido <strong>de</strong> aislados <strong>de</strong> soja y amaranto<br />
Las micro fotografías <strong>de</strong> las emulsiones fueron obtenidas en un microscopio<br />
LEICA DMLB (Leica Microsystems, Alemania) asociado a una cámara fotográfica<br />
digital DC100 (Leica Microscopy Systems Ltd., Suiza). El aumento total <strong>de</strong> las<br />
imágenes fue <strong>de</strong> 100X. En el momento <strong>de</strong> finalizar la homogenización se<br />
colocaron 200 μl <strong>de</strong> cada una <strong>de</strong> las emulsiones en 2 ml <strong>de</strong> buffer A conteniendo<br />
1% <strong>de</strong> SDS y se agitó suavemente para diluir la emulsión sin afectar las gotas.<br />
Luego se tomaron 20 μl <strong>de</strong> cada una <strong>de</strong> las emulsiones, se las colocó en un<br />
portaobjeto y cada muestra se cubrió cuidadosamente con un cubreobjeto para<br />
ser observadas en el microscopio y po<strong>de</strong>r tomar las microfotografías. Para<br />
evaluar la estabilidad <strong>de</strong> las emulsiones en el tiempo se repitió el mismo<br />
procedimiento luego <strong>de</strong> 1 h y 24 h <strong>de</strong>s<strong>de</strong> la finalización <strong>de</strong>l proceso <strong>de</strong><br />
emulsificación tomando muestras <strong>de</strong> la emulsión original almacenada en reposo<br />
a temperatura ambiente.<br />
1.2. Resultados y Discusión<br />
1.2.1. Caracterización estructural <strong>de</strong> los aislados<br />
1.2.1.1. Calorimetría diferencial <strong>de</strong> barrido (DSC)<br />
La Figura 1.8. muestra los termogramas obtenidos para los diferentes aislados<br />
ensayados, en ella se pue<strong>de</strong> observar que los aislados que no recibieron<br />
tratamiento ácido muestran dos transiciones endotérmicas correspondientes a la<br />
<strong>de</strong>snaturalización <strong>de</strong> diferentes especies proteicas. Las temperaturas <strong>de</strong><br />
<strong>de</strong>snaturalización son algo mayores para SN que para AN. En el caso <strong>de</strong> SN, el<br />
primer pico endotérmico se <strong>de</strong>tectó a 88,4 ± 0,3 °C y correspon<strong>de</strong> a la<br />
<strong>de</strong>snaturalización <strong>de</strong> la fracción β-conglicinina (Wagner, Sorgentini y col. 1996) y<br />
el segundo a 104,2 ± 0,2 °C el cual es atribuido al <strong>de</strong>splegamiento <strong>de</strong> la fracción<br />
glicinina (11S). Para el AN también se <strong>de</strong>tectaron dos endotermas a 75,5 ± 0,2 °C<br />
y 101,8 ± 0,3 °C. La primera correspon<strong>de</strong> a la <strong>de</strong>snaturalización <strong>de</strong> la fracción<br />
albúminas y la segunda a la <strong>de</strong> las globulinas (Martínez y Añón 1996). En el caso<br />
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