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METHODEN
wie sie Gramberg (1995) entwickelte, verzichtet. Statt dessen wurden die Fettsäuren der
NSO-Fraktion mittels einer mit Kaliumhydroxid belegten Kieselgelsäule von der
Neutralfraktion, welche Alkohole, Steroidalkohole etc. umfasst, getrennt. In dieser Säule
werden die Fettsäuren durch das mit KOH belegte Kieselgel in ihre Kaliumsalze überführt,
die aufgrund ihrer hohen Polarität an den Silanolgruppen des Kieselgels adsorbiert werden.
Für diese Trennung wurden 4 g Kieselgel 100 (63-200 µm, 2 h bei 180°C aktiviert)
mit 10 ml 5%iger KOH-Lösung in Isopropanol versetzt, in 25 ml Dichlormethan
aufgeschlämmt und blasenfrei in eine mit Watte verstopfte Glassäule (1 cm ID, 20 cm lang)
gefüllt. Nach dem Ablassen des Lösungsmittels bis etwa 2 cm über der Kieselgeloberfläche
wurde mit 1 cm Natriumsulfat (p.A.) überschichtet. Die Konditionierung erfolgte mit 80 ml
Dichlormethan. Nach dem Aufgeben der in Dichlormethan gelösten NSO-Fraktion wurde die
Neutralfraktion mit 120 ml Dichlormethan von der Säule eluiert. Anschließend wurden die
Fettsäuresalze mit 80 ml 2%iger Ameisensäure in Dichlormethan in freie Fettsäuren überführt
und diese mit 80 ml Dichlormethan von der Säule eluiert. Die erhaltenen Fraktionen wurden
am Rotationsverdampfer volumenreduziert, in gewogene Präparategläschen überführt und im
Stickstoffstrom bis zur Gewichtskonstanz eingedampft.
4.2 GASCHROMATOGRAPHISCHE UND GASCHROMATOGRAPHISCH/
MASSENSPEKTROMETRISCHE ANALYTIK
Um Verbindungen gaschromatographisch besser trennen bzw. erfassen zu können, müssen
solche Komponenten, die eine oder mehrere freie funktionelle Gruppen tragen (i.d.R. -COOH
und/oder -OH) derivatisiert, d.h. verestert und/oder verethert werden. Die Verbindungen
werden dadurch an apolaren Säulen (z.B. HP-1, DB-5) chromatographisch trennbar.
4.2.1 DERIVATSIERUNG DES PROBENMATERIALS
Vor der Derivatisierung wurden die Fraktionen geteilt, um einerseits Rückstellproben für
weitere Messungen zu haben und um andererseits bei hohen Fraktionsauswaagen die
Ionenquelle der Massenspektrometer nicht zu überlasten.
● Trimethylsilylierung mittels MSTFA
Die Proben wurden entsprechend ihrer Auswaage geteilt, sodass beim löslichen Bitumen eine
Gesamtkonzentration aller Verbindungen von ca. 2 mg/ml, bei den weiteren Fraktionen von
ca. 1 mg/ml erhalten wurde. Das entsprechende Aliquot wurde in 25 µl DCM abgenommen
und zusammen mit 25 µl N-Methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid (MSTFA, F 3 C-CO-
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