Handbuch der Nanoanalytik Steiermark 2005

M21: Negativkontrastierung als Diagnostikzwei bis fünf Zentimetern eine Wechselspannungvon 500 bis 1000 Volt angelegt. Dadurch werdendie Restmoleküle in der Kammer ionisiert. DieseRadikale werden zur Anode hin beschleunigt, wodie Netzchen (mit Trägerfilm) liegen. Dadurch wirdauf die Filmoberfläche eine Ladung aufgebracht, diesie für kurze Zeit an der Luft hydrophil werden lässt.Derart behandelte Netzchen sollten möglichst baldverwendet werden, da die aufgebrachte Ladungexponentiell wieder abnimmt.Nun wird ein befilmtes Kupfernetzchen auf einenTropfen Suspension gelegt (s. Abb. 3). Nacheiner Adsorptionszeit von etwa einer Minute wirddie Suspension mit Filterpapier weggesaugt. DieFilmoberfläche wird mit Wasser gewaschen, umeventuell in der Suspension enthaltene Salze, dieauskristallisieren könnten, zu entfernen. Es wird einTropfen Wasser auf die Oberfläche gebracht undmit Filterpapier wieder weggesaugt. Dies kann beiBedarf mehrmals gemacht werden. Danach wirdein Tropfen Schwermetallsalz-Lösung auf die Filmoberflächegebracht und nach ca. 10 Sekundenmit Filterpapier wieder weggesaugt. Dies machtman ein bis zweimal. Dann lässt man den Restdes Schwermetallfilms auf dem Präparat an derLuft trocknen. Dies ist nun die eigentliche Färbung.Das Präparat ist jetzt bereit für das Elektronenmikroskop.Abbildung 3:Elisabeth IngolicTechnische Universität GrazForschungsinstitut für Elektronenmikroskopie undFeinstrukturforschungund Zentrum für Elektronenmikroskopie GrazAusführung der Negativfärbung inschematischer Darstellung.Methoden:M2 | M26 | M44Lösungen: —Abbildung 2:Links: Schematische Darstellungder Negativkontrastierung. Rechts:Negativkontrastierung eines abnormenLipoproteins (25 nm).Institute:Kontakte:I4K15Adenoviren | Negativkontrastierung | Phosphorwolframsäure | Probenpräparation | RotavirenTransmissionselektronenmikroskopie | Uranylacetat56Handbuch der Nanoanalytik Steiermark 2005