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francine blumental de abreu - PHL © Elysio - FUNDAÇÃO ANTÔNIO ...

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citoplasmática mo<strong>de</strong>rada, porém em muitos casos há marcação nuclear.<br />

Enquanto as glândulas mamárias normais apresentam imunomarcação<br />

intensa, as tumorais apresentam marcação mo<strong>de</strong>rada ou fraca, além <strong>de</strong><br />

marcação nuclear. No tecido colorretal normal e tumoral observa-se<br />

imunocoloração mo<strong>de</strong>rada, porém o tumoral apresenta marcação nuclear<br />

(http://www.proteinatlas.org/). O escore <strong>de</strong> intensida<strong>de</strong> e extensão foi<br />

realizado visualmente pela estimativa da porcentagem <strong>de</strong> coloração positiva<br />

presente no citoplasma e membrana nuclear das células neoplásicas.<br />

A análise foi realizada <strong>de</strong> acordo com a intensida<strong>de</strong> (0: marcação<br />

ausente; 1: fraca; 2: mo<strong>de</strong>rada; 3: marcação forte) e extensão da marcação<br />

nas células neoplásicas (1: 1/3; 2: 1/3 a 2/3; 3: acima <strong>de</strong> 2/3 da área total do<br />

corte).<br />

Os testes estatísticos utilizados foram Exato <strong>de</strong> Fisher e Qui-<br />

Quadrado <strong>de</strong> Pearson, sendo que foram consi<strong>de</strong>rados resultados<br />

estatisticamente significativos aqueles com P< 0,05.<br />

3.2.6 Análise Citogenética Clássica<br />

A análise cromossômica foi realizada em sete indivíduos da família<br />

SM89. Para a cultura dos linfócitos, foram coletados 5 mL <strong>de</strong> sangue<br />

periférico <strong>de</strong> cada indivíduo com o anti-coagulante heparina. Os linfócitos<br />

foram cultivados em meio RPMI (GIBCO) acrescido <strong>de</strong> 10% <strong>de</strong> Soro Bovino<br />

Fetal (Hyclone), 50 µg/mL <strong>de</strong> penicilina, estraptavidina (0,5%) e<br />

fitohemaglutinina (SIGMA). A cultura das células foi realizada segundo a<br />

metodologia <strong>de</strong>scrita por Moorhead et al. (1960). Após 71 horas, as culturas<br />

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