Liečivé rastliny v meniacich sa environmentálnych podmienkach

Vliv abiotických a biotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005
s předním a zadním panelem ze skla o tloušťce 5 mm. Přední část kořenových boxů byla
skosena, aby byl dosažen růst kořenů podél skla. Prosklené části boxů jsme před slunečním
zářením chránili pevnou černou folií překrytou alobalem pro zvýšení albeda. Pro pokus jsme
zhotovili 4 kontejnery. Dva kontejnery byly kontrolní tj. nebyly zatížené a dva byly v průběhu
celého měření zatíženy železnými válci o hmotnosti 39 kg, zabalenými v igelitu, aby
nedocházelo k uniku železitých sloučenin); tím jsme dosáhli stálého tlaku 5,1 kPa. Kontejnery
jsme osázeli dne 20.4.2003 dvouletými nenarašenými sazenicemi smrku ztepilého (Picea
abies /L./ Karsten) a umístili do pravidelně zavlažovaného pařeniště v botanické zahradě a
arboretu MZLU v Brně. 7 sazenic bylo kontrolních a 8 experimentálních.
Po ukončení pokusu byly u kontrolních a experimentálních rostliny vyjmuty jejich
kořenové systémy, separovány, jemně vyčištěny a fixovány v roztoku FAA (roztok 90 ml
70% etanolu, 5 ml ledové kyseliny octové a 5 ml 40% formaldehydu, Němec et al. 1962)..
Z každého z nich bylo odebráno několik dlouhých jemných kořenů. Řezy pro histologii byly
pak provedeny za kořenovou čepičkou a také proximálně z míst starších, kde již proběhl
tloušťkový růst.
Preparáty byly pro zvýšení kontrastu barveny floroglucinolem + HCl, kdy se
lignifikované buněčné stěny barví červeně (blíže viz Němec et al. 1962). Obarvené řezy byly
uloženy v glycerolu. Vlastní vyhodnocení spočívalo v nasnímání na mikroskopu propojeným
s počítačem digitální kamerou v biometrické laboratoři MZLU Brno.
Ze získaných snímků bylo vybráno u kontrolních sazenic 8 snímků a 19 snímků u
experimentálních sazenic pro analýzu sekundárního xylému. Pro analýzu metaxylému bylo
vybráno 6 snímků kontrolních a 9 experimentálních.
Vybrané snímky byly upraveny v programu AdobePhotoshop a to tak, že u vzorků
odebraných za kořenovými špičkami všechny tracheidy metaxylému a u vzorků z proximálně
starších míst jsme vybarvili několik řad buněk sekundárního xylému (deuteroxylému)
zachycující tloušťkový růst od středu až ke kambiální zóně. Další úpravou v programu
AdobePhotoshop byl získán černobílý obraz zachycující pouze vybrané lumeny. Následně byl
uvnitř plochy ohraničenou vybarvenými lumeny vykresleny parenchymatické buňky,
pryskyřičné kanálky a místa, kde byly lumeny obtížně čitelné a opět byl takový obraz upraven
stejným způsoben jak je popsáno výše.
V rámci této studie se metaxylémem rozumí buňky, které jsou diferencovány dostředivě
od protoxylémových skupin (exarchní xylém). Sekundárním xylémem pak tracheidy
vytvořené v první vlně činnosti kambia, které dosud neuzavřelo kambiální kruh nad
protoxylémovými skupinami.
99