LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

More documents

Recommendations

Info

Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Materiál a metodika Rostlinný materiál a inokulace Pro studium vlivu exogenní aplikace cytokininů na průběh infekce biotrofní houbou B. lactucae byl zvolen genotyp salátu L. sativa (Cobham Green) vykazující náchylnost/kompatibilitu k použité rase B. lactucae Regel (NL 16). Semenáčky byly předpěstovány v perlitu a přesazeny do květníků se zahradním substrátem. Rostliny byly pěstovány ve fytotronu v režimu 12 h světlo/12 h tma při teplotě 18°C/15°C. Ve stáří 10 týdnů byly z rostlin odděleny listové disky o průměru 12 mm (ze třetího až šestého nejmladšího listu). Disky byly umístěny adaxiální stranou dolů do Petriho misek s buničinou a filtračním papírem nasycenými jednotlivými roztoky (viz dále). Po 24 hodinách infiltrace roztoků do listových disků při sníženém tlaku byla polovina vzorků z každé varianty inokulována, polovina sloužila jako kontrola. Inokulum (suspenze konidií v destilované vodě o hustotě cca 5·10 4 -10 5 konidií na cm 3 ) bylo rozptýleno na abaxiální stranu listových disků. Vzorky byly inkubovány ve fytotronu při teplotě 15°C/10°C, prvních 24 hodin ve tmě a následně v režimu 12 h světlo/12 h tma. Měření bylo provedeno u kontrolních (neoddělených) listů salátu v den oddělování listových disků (kontrola) a na listových discích po 11 dnech po inokulaci (tj. po 12 dnech po aplikaci příslušných roztoků). Roztoky cytokininů V experimentech byly použity dvě formy aromatických cytokininů: 2·10 -4 M metatopolin (volná báze) /7/ v 0,5% dimethylsulfoxidu (DMSO) a 2·10 -4 M 3-MeOBAPR (ribozid) /8/ v 0,25% DMSO. Jako referenční roztoky byly použity: destilovaná voda (H 2 O) a 0,5% DMSO (vyšší koncentrace roztoku užívaného k rozpuštění cytokininů). Stanovení míry sporulace a výnosu spor Na listových discích v různých variantách pokusu byl stupeň napadení hodnocen v průběhu 11 dní po inokulaci na základě makroskopického stanovení sporulace patogenu, kde souhrnná hodnota vyjadřuje procento maximální možné sporulace /9/. Výnos spor byl stanoven 14. den po inokulaci omytím disků v destilované vodě a počítáním hustoty sporové suspenze v Bürkerově komůrce. V každé variantě bylo provedeno 5 měření ve třech opakováních. Data byla statisticky vyhodnocena hierarchickou ANOVOU a Bonferoniho testem mnohonásobných porovnání v programu NCSS 2000. Obsah fotosyntetických pigmentů Listové disky byly zhomogenizovány v 80% acetonu s malým množstvím MgCO 3 , homogenát byl zcentrifugován (5 min, 3600g, pokojová teplota) a následně byla stanovena absorbance supernatantu při vlnových délkách 470; 646,8; 663,2 a 750 nm oproti 80% acetonu (spektrofotometr UV6-550 Unicam, Cambridge, Anglie). Obsah chlorofylů a karotenoidů byl vypočítán podle Lichtenthalera /10/. Měření maximální fotochemické účinnosti fotosystému II Na kontrolních (neoddělených) listech salátu a na listových discích byla změřena maximální fotochemická účinnost fotosystému II (parametr F V /F P ) pomocí fluorimetru PEA (Hansatech, King’s Lynn, Anglie). Před měřením byly vzorky 30 minut zatemněny. Fluorescenční signál byl snímán z adaxiální strany listů (disků), doba detekce byla 2 s, intenzita excitačního záření 6000 μmol fotonů m -2 .s -1 . Stanovení míry peroxidace lipidů Listové disky byly homogenizovány ve 4 cm 3 0,1% kyseliny trichloroctové (TCA). Poté byl homogenát zcentrifugován (10 min, 10000g, 4°C) a k 1 cm 3 supernatantu byly přidány 4 cm 3 20% TCA obsahující 0,5% kyselinu thiobarbiturovou (TBA). Tato směs byla 30 min vařena na vodní lázni, poté rychle schlazena na ledové tříšti a zcentrifugována (10 min, 10000g, 4°C). U supernatantu byla změřena absorbance při vlnových délkách 532 a 600 nm (spektrofotometr CHEM 2000, Ocean Optics, Dunedin, USA). Jako referenční vzorek byl 303
Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 použit roztok 20% TCA obsahující 0,5% TBA. Rozdíl absorbancí (ΔA = A 532 - A 600 ) odráží množství reakčních produktů TBA a toto množství indikuje míru lipidové peroxidace /11/. Výsledky a diskuse Náchylnost genotypu L. sativa (Cobham Green) k rase B. lactucae (NL16) se projevuje vysokou intenzitou sporulace patogenu, tj. tvorby konidioforů s nepohlavními sporami, makroskopicky pozorovatelnou od 5. dne po inokulaci /12/. Exogenní aplikace obou zkoumaných cytokininů (meta-topolinu a ribozidu 3-MeOBAPR) na listová pletiva 24 h před inokulací významně potlačila sporulaci B. lactucae (Obr. 1) a signifikantně snížila výnos spor (Tab. 1). Aplikace DMSO neovlivnila intenzitu sporulace ani výnos spor, oba parametry byly srovnatelné s kontrolní variantou, ve které byla použita destilovaná voda. sporulace [% max] 80 70 60 50 40 30 20 10 0 H 2 O DMSO mT MeOR 5 6 7 8 9 10 11 dny po inokulaci Obr. 1: Intenzita sporulace B. lactucae na listových discích L. sativa cv. Cobham Green 5. - 11. den po inokulaci. Listové disky byly inkubovány ve čtyřech variantách: v destilované vodě (H 2 O), 0,5% dimethylsulfoxidu (DMSO), v 2·10 -4 M roztoku meta-topolinu (mT) a 2·10 -4 M roztoku ribozidu 3-MeOBAPR (MeOR). 304
Page 4 and 5:
Vliv abiotických a biotických str
Page 6 and 7:
Page 8 and 9:
Page 10 and 11:
Page 12 and 13:
Page 14 and 15:
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
Page 36 and 37:
Page 38 and 39:
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
150 Vliv abiotických a biotických
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95:
Page 96 and 97:
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115:
Page 116 and 117:
Page 118 and 119:
Page 120 and 121:
Page 122 and 123:
Page 124 and 125:
Page 126 and 127:
Page 128 and 129:
Page 130 and 131:
Page 132 and 133:
Page 134 and 135:
Page 136 and 137:
Page 138 and 139:
Page 140 and 141:
Page 142 and 143:
Page 144 and 145:
Page 146 and 147:
Page 148 and 149:
Page 150 and 151:
Page 152 and 153:
Page 154 and 155:
Page 156 and 157:
Page 158 and 159:
Page 160 and 161:
Page 162 and 163:
Page 164 and 165:
Page 166 and 167:
Page 168 and 169:
Page 170 and 171:
Page 172 and 173:
Page 174 and 175:
Page 176 and 177:
Page 178 and 179:
Page 180 and 181:
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4
Page 182 and 183:
Page 184 and 185:
Page 186 and 187:
Vliv biotických a abiotických str
Page 188 and 189:
Page 190 and 191:
Page 192 and 193:
Page 194 and 195:
Page 196 and 197:
Page 198 and 199:
Page 200 and 201:
Page 202 and 203:
Page 204 and 205:
Page 206 and 207:
Page 208 and 209:
Page 210 and 211:
Page 212 and 213:
Page 214 and 215:
Page 216 and 217:
Page 218 and 219:
Page 220 and 221:
Page 222 and 223:
Page 224 and 225:
Page 226 and 227:
Page 228 and 229:
Page 230 and 231:
Page 232 and 233:
Page 234 and 235:
Page 236 and 237:
Page 238 and 239:
Page 240 and 241:
Page 242 and 243:
Page 244 and 245:
Page 246 and 247:
Page 248 and 249:
Page 250 and 251:
Page 252 and 253: Vliv biotických a abiotických str
Page 318 and 319: Vliv abiotických a biotických str
Page 352 and 353:
Page 354 and 355:
Page 356 and 357:
Page 358 and 359:
Page 360 and 361:
Page 362 and 363:
Page 364 and 365:
Page 366 and 367:
Page 368 and 369:
Page 370 and 371:
Page 372 and 373:
Page 374 and 375:
Page 376 and 377:
Page 378 and 379:
Page 380 and 381:
Page 382:
show all

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach