Liečivé rastliny v meniacich sa environmentálnych podmienkach

Vliv abiotických a biotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005
Kontroly životnosti a regenerace rostlin
Kontroly životnosti regenerace rostlin po jednotlivých krocích kryoprotokolu umožnily
vyhodnotit jejich vliv na výslednou životnost a regeneraci rostlin po kryoprezervaci. Různá
doba desikace umožnila stanovit citlivost jednotlivých odrůd k desikaci.
1. Kontrola po aplikaci 2 M sacharosy – poškození rostlin po předkultivaci.
2. Kontrola po sycení vrcholů na 0,7 M sacharose – poškození rostlin po působení
kryoprotektantu a jím způsobené dehydrataci.
3. Kontrola vrcholů bez desikace nad silikagelem – poškození vrcholů vlivem vodní lázně
při odtávání vzorků.
4. Kontrola po desikaci nad silikagelem – vliv desikace vrcholů po dobu 1 nebo 2 hodin.
Kontroly u 3. a 4. kroku kryoprotokolu byly rozděleny podle toho zda byly vrcholy zasaženy
tekutým dusíkem nebo ne na pozitivní a negativní kontroly. Vrcholy, které byly ponořeny do
tekutého dusíku a následně rozmraženy ve vodní lázni byly označeny jako pozitivní kontrola
a vrcholy, které nebyly vystaveny tekutému dusíku a byly pouze ponořeny do vodní lázně
podstavovaly negativní kontrolu. Rozdíl mezi negativní a pozitivní kontrolou umožnil
stanovit vliv samotného procesu zamražení v tekutém dusíku na životnost a regeneraci rostlin.
Hodnocení životnosti a regenerace rostlin
Hodnocení životnosti rostlin bylo provedeno po třech týdnech a hodnocení regenerace po 8
týdnech od vysázení. Za živé byly považovány rostlinky u nichž byl patrný růst a nedocházelo
u nich ke ztrátě chlorofylu. Apikální růst spojený s tvorbou stonku byl známkou regenerace
rostlin.
Výsledky a diskuse
Vliv jednotlivých kroků kryoprotokolu na regeneraci rostlin
Byl hodnocen vliv jednotlivých kroků kryoprotokolu na kryoprezervovatelnost odrůd (%
regenerace rostlin po kryoprezervaci).
U odrůdy Désirée byla regenerace rostlin po kryoprezervaci výsledkem působení vlivu
odtávání a dedikace (obr. 1). Největší vliv na kryoprezervovatelnost této odrůdy měla desikace
vegetativních vrcholů. Mezi 0. a 1. hodinou desikace došlo u negativní kontroly k poklesu
regenerace rostlin o 38 %. Mezi 1. a 2. hodinou desikace nebyl u negativní kontroly zjištěn
významný rozdíl v regeneraci rostlin. Vlivem odtátí došlo k poklesu regenerace rostlin o 25 %.
U pozitivní kontroly došlo vlivem 1 hodinové desikace k přechodnému nárůstu regenerace
rostlin o 10 %. Při optimální desikaci bylo dosaženo 42 % regenerace rostlin po kryoprezervaci.
Ačkoliv patří odrůda Désirée mezi odrůdy bramboru odolné vůči suchu, byla u této odrůdy
zjištěna citlivost k desikaci. Desikace vrcholů, spolu s efektem odtání, snižovala potenciální
83