LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

More documents

Recommendations

Info

Vliv abiotických a biotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Vliv složení kultivačního média na růst rostlin révy vinné během in vitro termoterapie Břetislav Křižan, Eva Ondrušiková, Kamila Trčková Mendelova zemědělská a lesnická univerzita, Zahradnická fakulta, Mendeleum – Ústav genetiky, Valtická 337, Lednice 691 44, e-mail: bretislav.krizan@seznam.cz Souhrn Použití in vitro termoterapie révy s následným odběrem vrcholových segmentů je podmíněno růstem rostlin na médiích při působení teploty 37 o C. Pouze z rostlin, které v těchto podmínkách přirůstají je možno odebírat ozdravené (viruprosté) vrcholové segmenty. Obsah růstových regulátorů v kultivačním médiu růst rostlin významně ovlivňuje. V práci byl hodnocen růst rostlin a jejich úhyn během termoterapie na třech modifikovaných multiplikačních a jednom kořenícím médiu Z výsledků vyplývá, že médium MS s 0,7 mg.l -1 BA a 0,1 mg.l -1 IAA, ztužené agarem je pro in vitro termoterapii révy nejvhodnější. Jako nevhodné se ukázalo použití kořenícího média. Úvod K ozdravování révy od virových chorob v kultuře in vitro je využívána metoda spočívající v kombinaci termoterapie s následným odběrem růstového vrcholu (část větší než meristém). Metoda využívá efektu klesající koncentrace virů směrem k vegetačnímu vrcholu a inhibice reprodukce a šíření viru v důsledku zvýšených teplot. (VALERO et al. 2003) Termoterapie rostlin in vitro je používána méně často než termoterapie v subsrátu zakořenělých sazenic. Její výhodou je však úspora místa v termoboxu a snadný odběr již sterilních růstových vrcholů. LEONHARDT et al. (1998) doporučuje po tepelném ošetření odebírat vrcholové části velikosti 5 mm a tím se vyhnout možnému výskytu somaklonální variability. Při odběru části menší než 1mm, popřípadě izolaci meristému se riziko výskytu variability zvyšuje. Pro révu vinnou je doporučována teplota 37 o C v průběhu termoterapie. Tato teplota klade zvýšené nároky na použité živné médium, neboť nejen šíření viru, ale i růst rostliny je do značné míry ovlivněn. SPIEGEL et al. (1995) uvádí jako nejdůležitější faktor pro růst rostlin při in vitro termoterapii přítomnost BA v koncentraci od 0,2 mg.l -l do 6 mg.l -l v kultivačním médiu. Při použité koncentraci BA 6 mg.l -l média však docházelo k výraznému úhynu rostlin během termoterapie, ve srovnání s nižšími koncentracemi. LEONHARDT et al. (1998) s úspěchem použili MS médium bez cytokininu, avšak s přídavkem 0,2 mg.l-l IBA, ve kterém byl agar nahrazen gelritem. Autoři uvádějí, že při použití již zakořenělých rostlin pro termoterapii nedocházelo k jejich úhynům vlivem použité teploty (35 o C). BLAZINA et al. (1991) uvádí přídavek kyseliny jasmonové (0,01-1 mg.l -l ) do MS média jako faktor podporující elongaci révy. Růstové vrcholy je nutno odebírat pouze z rostlin aktivně rostoucích během terapie. Vzhledem k rozporům mezi jednotlivými pracovišti v použití růstových regulátorů v médiu během terapie bylo účelem našeho experimentu nalézt vhodné médium, provokující rostlinky révy k růstu v podmínkách tepelné terapie. 163
Vliv abiotických a biotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Materiál a metodika Do pokusu byly zařazeny tři odrůdy révy vinné: Cabernet Sauvignon, Sauvignon a Pola. Rostliny odrůdy Cabernet Sauvignon byly positivní na ArMV, rostliny odrůdy Pola byly positivní na ArMV, GFLV a GLRaV 3 a odrůda Sauvignon byla negativní při testování metodou ELISA. Analyzovány byly vzorky listů. Primární kultury byly založeny 7. 5. 2004. Z rostlin byly odebrány nodální segmenty, které byly sterilizovány a kultivovány na modifikovaném médiu MS (Murashige Skoog, 1962) s 0,7 mg.l -l BA, 0,1 mg.l -1 IAA a poloviční koncentrací vápníku (220 mg.l -1 CaCl 2 x 2H 2 O). Použitá kultivační teplota byla 23 ± 2 o C, fotoperioda 16/8 a použité světlo Sylvania standard (30-35 μE.m -2 .s -1 ). Každý měsíc byly rostliny přeneseny na čerstvé médium. Doba kultivace na médiu byla 7 měsíců. Následně byly rostliny velikosti 10 mm podrobeny terapii při fotoperiodě 12/12 (světlo/tma), při střídání teplot 37 o C (světlo) a 35 o C (tma). Relativní vzdušná vlhkost nebyla upravována. Termoterapie trvala 45 dní. Délka rostli byla měřena po 25-ti a 45-ti dnech od začátku terapie. Z rostlin ošetřených termoterapií byly odebrány vrcholové části velikosti 3-4 mm a kultivovány v rostliny. Pro každou variantu média bylo použito 20 rostlin z každé odrůdy. Pro statistické vyhodnocení byl použit průměr a střední chyba. Označení Médium G MS, 0,2 mg.l -1 IBA, 20 g.l -1 sacharózy, gerlit A MS, 0,7 mg.l -1 BA, 0,1 mg.l -1 IAA, agar O MS bez růstových regulátorů, agar Ca MS, 0,7 mg.l -1 BA, 0,1 mg.l -1 IAA, agar a 1/2 Ca Tab. č. I: Označení jednotlivých médií zahrnutých do experimentu. Výsledky a diskuse Na všech použitých médiích rostliny tvořily pouze jeden výhon, multiplikace nebyla pozorována. Největších přírůstků bylo dosaženo na médiu A. Růst jednotlivých odrůd na všech použitých médiích měl obdobný průběh. Nejmenší přírůstky měla odrůda Cabernet Sauvignon (Graf 1), která na médiu s poloviční koncentrací vápníku a na kořenícím médiu prakticky nepřirůstala. Odrůdy Sauvignon a Pola tvořily přírůstky i na médiu s poloviční koncentrací vápníku (Grafy 2 a 3). I u těchto odrůd zůstalo kořenící médium prakticky bez efektu. Rostliny kořenily pouze na médiu G. Tvorba kořenů na tomto médiu měla pravděpodobně za následek vysílení rostlin, což souvisí s vyšším úhynem během terapie. Výška (mm) 70 60 50 40 30 20 10 0 Graf č.1 Výška rostlin odrůdy Cabernet Sauvignon během termoterapie in vitro. 1den 25 den 45 den A O Ca G 164
Page 4 and 5:
Vliv abiotických a biotických str
Page 6 and 7:
Page 8 and 9:
Page 10 and 11:
Page 12 and 13:
Page 14 and 15:
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
Page 36 and 37:
Page 38 and 39:
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
150 Vliv abiotických a biotických
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95:
Page 96 and 97:
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115: Vliv abiotických a biotických str
Page 180 and 181: 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4
Page 186 and 187: Vliv biotických a abiotických str
Page 214 and 215:
Vliv biotických a abiotických str
Page 216 and 217:
Page 218 and 219:
Page 220 and 221:
Page 222 and 223:
Page 224 and 225:
Page 226 and 227:
Page 228 and 229:
Page 230 and 231:
Page 232 and 233:
Page 234 and 235:
Page 236 and 237:
Page 238 and 239:
Page 240 and 241:
Page 242 and 243:
Page 244 and 245:
Page 246 and 247:
Page 248 and 249:
Page 250 and 251:
Page 252 and 253:
Page 254 and 255:
Page 256 and 257:
Page 258 and 259:
Page 260 and 261:
Page 262 and 263:
Page 264 and 265:
Page 266 and 267:
Page 268 and 269:
Page 270 and 271:
Page 272 and 273:
Page 274 and 275:
Page 276 and 277:
Page 278 and 279:
Page 280 and 281:
Page 282 and 283:
Page 284 and 285:
Page 286 and 287:
Page 288 and 289:
Page 290 and 291:
Page 292 and 293:
Page 294 and 295:
Page 296 and 297:
Page 298 and 299:
Page 300 and 301:
Page 302 and 303:
Page 304 and 305:
Page 306 and 307:
Page 308 and 309:
Page 310 and 311:
Page 312 and 313:
Page 314 and 315:
Page 316 and 317:
Page 318 and 319:
Page 320 and 321:
Page 322 and 323:
Page 324 and 325:
Page 326 and 327:
Page 328 and 329:
Page 330 and 331:
Page 332 and 333:
Page 334 and 335:
Page 336 and 337:
Page 338 and 339:
Page 340 and 341:
Page 342 and 343:
Page 344 and 345:
Page 346 and 347:
Page 348 and 349:
Page 350 and 351:
Page 352 and 353:
Page 354 and 355:
Page 356 and 357:
Page 358 and 359:
Page 360 and 361:
Page 362 and 363:
Page 364 and 365:
Page 366 and 367:
Page 368 and 369:
Page 370 and 371:
Page 372 and 373:
Page 374 and 375:
Page 376 and 377:
Page 378 and 379:
Page 380 and 381:
Page 382:
show all

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach