Liečivé rastliny v meniacich sa environmentálnych podmienkach

Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005
A O
B C
OH
O OH
O
OH
OH
O
CH 3
SH
O
Salicylová kyselina
Acetylsalicylová kyselina
Thiosalicylová kyselina
D
O
OH
E
O
OH
OH
OH
O
O 2 N
NO 2
3,5-dinitrosalicylová kyselina
S
HO
O
5-sulfosalicylová kyselina
Obr. 1: Chemické vzorce studovaných sloučenin
Metod zabývajících se studiem kyseliny salicylové a jejich derivátů je mnoho. Převážně jsou
to různé modifikace chromatografických, elektroforetických a také elektrochemických metod /8,27-
30/.
Cílem práce bylo studium elektrochemického chování kyseliny salicylové a jejich derivátů
(kyselina acetylsalicylová, thiosalicylová, 3,5-dinitrosalicylová, 5-sulfosalicylová) na uhlíkové
pastové elektrodě (CPE) pomocí diferenční pulzní voltametrie (DPV). Dále studovat vliv složení a
pH základního elektrolytu (Britton-Robinson, HCl-NaCl a citrátový pufr) na stanovení a získané
poznatky poté aplikovat na analýzu uvedených analytů pomocí průtokové injekční analýzy spojené
s elektrochemickým detektorem (FIA-ED).
Materiál a metodika
Chemikálie. Všechny chemikálie byly pořízeny od Sigma-Aldrich (St. Louis, USA). Minerální
olej (bez RNAs, DNAa a proteas) byl také od firmy Sigma-Aldrich (St. Louis, USA). Zásobní
methanolické roztoky kyseliny salicylové a jejich derivátů o koncentraci 10 mg.ml -1 byly
uchovávány v temnu při teplotě –20 °C. Pracovní roztoky se připravovali denně, ředěním zásobních
roztoků. Roztoky pro FIA-ED stanovení byly filtrovány přes Teflonové disky určené pro HPLC
analýzu (0,45 μm; MetaChem, Torrance, CA, USA). pH bylo měřeno pomocí WTW inoLab Level
3 s Level 3 terminálem (Weilheim, Německo), řízeným počítačovým programem (MultiLab Pilot;
Weilheim, Německo). pH elektroda (SenTix H, pH 0..14/0..100°C/3mol.l -1 KCl) byla kalibrována
pomocí sady WTW pufrů (Weilheim, Německo).
Diferenční pulzní voltametrie. Elektrochemické měření ve stacionárním systému bylo
prováděno na AUTOLABu (EcoChemie, Holandsko) ve spojení s VA-Stand 663 (Metrohm,
Switzerland) v tříelektrodovém zapojení. Jako pracovní elektroda byla použita uhlíková pastová
elektroda (složení pasty: 70 % uhlíkového prášku a 30 % minerálního oleje (m/m); použito
teflonové tělo s průměrem aktivní elektrodové plochy 2,5 mm; povrch elektrody byl leštěn před
každým měřením jemným filtračním papírem určeným pro analýzu), referentní elektroda
(Ag/AgCl/3 M KCl) a tyčinka ze skelného uhlíku jako pomocná elektroda. Pro stanovení byla
použita diferenční pulzní voltametrie s těmito nastavenými parametry: počáteční potenciál 0 V,
248