LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

More documents

Recommendations

Info

Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 do skupiny prechodných kovov ako Cu, Fe, alebo Zn, ktoré môžu indukovať oxidačný stres prostredníctvom Fentonovej reakcie /20, 22/. Predpokladá sa, že stres z kadmia môže spustiť biosyntézu H 2 O 2 indukciou NADPH oxidázy a antioxidačných enzýmov, pričom nižšie hladiny RFK môžu plniť úlohu signálnych molekúl a tak indukovať „obranné“ gény proti toxicite Cd /18/. Cytokiníny okrem svojej hlavnej funkcie v rastlinnách - aktivácie bunkového delenia a potláčania apikálnej dominancie - sa podieľajú aj na zvyšovaní rezistencie rastlín voči extrémnym podmienkam a spomaľovaní senescencie /24/. Zistilo sa že, cytokiníny efektívne zachytávaj[ voľné radikály a už pri nízkych koncentráciách účinne eliminujú reaktívne formy kyslíka, hlavne hydroxylové radikály a inhibujú hypersenzitívnu reakciu, čím môžu bunku chrániť pred stresom /3/. Na základe predchádzajúcich zistení o zmiernení nepriaznivých účinkov kadmia na fotosyntetický aparát a celkový obsah proteínov v klíčnych listoch horčice bielej Sinapis alba L. /14/ sme sa zamerali na sledovanie zmien aktivity antioxidačných enzýmov superoxiddismutáza, kataláza a peroxidáza v oddelených klíčnych listoch horčice, kultivovaných na médiu s pridaním kadmia a kadmia spolu s kinetínom. Materiál a metodika Oddelené klíčne listy horčice bielej (Sinapis alba L., cv. Zlata, gen.: C152110) kultivované v Petriho miskách na filtračnom papieri v rastovej komore LKJ 032 A1M pri teplote 25±1 o C, intenzite osvetlenia 64.4 μmol m -2 s -1 a 14-h fotoperióde 14 dní slúžili ako pokusný materiál. Kultivačné médium obsahovalo 3.10 -4 M Cd(NO 3 ) 2 .4H 2 O a 3.10 -5 M roztoku kinetínu v destilovanej vode s obsahom 0,1% penicilínu na zabránenie kontaminácie. Kontrolné klíčne listy boli kultivované na destilovanej vode s pridaním penicilínu. Na stanovenie aktivity antioxidačných enzýmov boli pripravené homogenáty z klíčnych listov v 24 hodinových intervaloch počas desiatich dní kultiváciei homogenizáciou v tekutom dusíku a rozpustené v 50 mM Na-fosfátovom EDTA tlmivom roztoku pH 7,5. Homogenát bol centrifugovaný diferenciálnou centrifugáciou pri 1 500 g 5 min. a 12 000 g 30 min. Výsledný supernatant bol použitý na stanovenie aktivity jednotlivých enzýmov bez ďalšej úpravy. Aktivita katalázy (CAT, E.C. 1.11.1.6) bola stanovená spektrofotometricky /11/ a namerané hodnoty absorbancií pri vlnovej dĺžke 240 nm boli dosadené do vzorca pre výpočet špecifickej aktivity vyjadrej v μmol H 2 O 2 . min -1 .mg -1 bielkovín /8/. Aktivita guaiakolovej peroxidázy (GPX, E.C.1.11.1.7) bola stanovovaná spektrofotometricky na základe oxidácie 281
Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 guaiakolu v prítomnosti H 2 O 2 pri 440 nm /10/. Špecifická aktivita bola vyjadrená ako jednotka enzymatickej aktivity u.min -1 .mg -1 bielkovín. Aktivita superoxid dismutázy (SOD, E.C.1.15.1.1) bola stanovovaná spektrofotometricky pri vlnovej dĺžke 560 nm /16/. Jej aktivita je vyjadrená ako rozdiel absorbancie roztoku bez bielkovín (blanck) a absorbancie jednotlivých skúmaných vzoriek. Koncentrácia proteínov v supernatante bola stanovená kolorimetricky s BSA ako štandardom /4/. Zmeny v aktivite jednotlivých enzýmov sú vyjadrené v percentách oproti kontrole. Každý experiment bol opakovaný najmenej trikrát v rôznom časovom období. Získané hodnoty boli štatisticky vyhodnotené sumárnou štatistikou a rozdiely medzi súbormi vyjadrené preukaznosťou použitím Srudent t-testu (Microsoft Excel). Výsledky a diskusia Kultivácia klíčnych listov horčice na médiu s kadmiom urýchľovala ich senescenciu. Zatiaľ čo kontrolné a kultivované na kadmiovom médiu s pridaním kinetínu začali prejavovať príznaky starnutia až na 11.-12. deň kultivácie, kadmiové už na 7. deň. Toto predčasné starnutie bolo sprevádzané aj zvýšenou aktivitou sledovaných antioxidačných enzýmov (Obr.1).. Najcitlivešie reagovala na prítomnosť kadmia peroxidáza preukazným zvýšením aktivity oproti kontrole už po 24. hodinách kultivácie ako na médiu s Cd, tak aj na Cd+kinetín (Obr. 1B.). Kataláza reagovala na Cd v neskorších fázach kultivácie a zdá sa, že kinetín neovplyvnil podstatne jej aktivitu oproti Cd (Obr.1 A). Prítomnosť Cd v médiu sa prejavila preukazným zvýšením aktivity SOD až na 7. deň kultivácie. Kinetín však pravdepodobne zmiernil vplyv kadmia, pretože hodnoty aktivity SOD na médiu Cd+kinetín sa neodlišovali od kontrolných (Obr. 1 C). Následok pôsobenia Cd na rastlinné membrány je oxidačný stres, ktorý vyvoláva zmeny v aktivite antioxidačných enzýmov. Experimentálne výsledky sú často veľmi protichodné. Pozorovala sa výrazne zvýšená aktivita antioxidačných enzýmov indukovaná Cd už v krátkom časovom úseku po aplikácii /7, 12/, ako aj opačná tendencia /19/, alebo striedavé zvýšenie a zníženie aktivity, pričom jednotlivé antioxidačné enzýmy boli striedavo aktivované a utlmované /22/. Vplyv Cd na rastlinné antioxidačné enzýmy závisí od koncentrácie Cd, druhu rastliny a kultivačných podmienkach experimentu /21/. V našom pokuse sme pracovali s oddelenými klíčnymi listami horčice priamo kultivovanými na médiu s dosť vysokou koncentráciou Cd ++ iónov (3.10-4 M) a kadmium boli absorbované bez akýchkoľvek bariér priamo do medzibunkových priestorov listu, teda priamo k membránam buniek.Vysoká koncentrácia H 2 O 2 po aplikácii Cd 0,5 µM koncentrácie v listoch hrachu vyvolávala zvýšenú produkciu RFK, čomu nasvedčovala vysoká hladina 282
Page 4 and 5:
Vliv abiotických a biotických str
Page 6 and 7:
Page 8 and 9:
Page 10 and 11:
Page 12 and 13:
Page 14 and 15:
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
Page 36 and 37:
Page 38 and 39:
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
150 Vliv abiotických a biotických
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95:
Page 96 and 97:
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115:
Page 116 and 117:
Page 118 and 119:
Page 120 and 121:
Page 122 and 123:
Page 124 and 125:
Page 126 and 127:
Page 128 and 129:
Page 130 and 131:
Page 132 and 133:
Page 134 and 135:
Page 136 and 137:
Page 138 and 139:
Page 140 and 141:
Page 142 and 143:
Page 144 and 145:
Page 146 and 147:
Page 148 and 149:
Page 150 and 151:
Page 152 and 153:
Page 154 and 155:
Page 156 and 157:
Page 158 and 159:
Page 160 and 161:
Page 162 and 163:
Page 164 and 165:
Page 166 and 167:
Page 168 and 169:
Page 170 and 171:
Page 172 and 173:
Page 174 and 175:
Page 176 and 177:
Page 178 and 179:
Page 180 and 181:
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4
Page 182 and 183:
Page 184 and 185:
Page 186 and 187:
Vliv biotických a abiotických str
Page 188 and 189:
Page 190 and 191:
Page 192 and 193:
Page 194 and 195:
Page 196 and 197:
Page 198 and 199:
Page 200 and 201:
Page 202 and 203:
Page 204 and 205:
Page 206 and 207:
Page 208 and 209:
Page 210 and 211:
Page 212 and 213:
Page 214 and 215:
Page 216 and 217:
Page 218 and 219:
Page 220 and 221:
Page 222 and 223:
Page 224 and 225:
Page 226 and 227:
Page 228 and 229:
Page 230 and 231: Vliv biotických a abiotických str
Page 318 and 319: Vliv abiotických a biotických str
Page 330 and 331:
Page 332 and 333:
Page 334 and 335:
Page 336 and 337:
Page 338 and 339:
Page 340 and 341:
Page 342 and 343:
Page 344 and 345:
Page 346 and 347:
Page 348 and 349:
Page 350 and 351:
Page 352 and 353:
Page 354 and 355:
Page 356 and 357:
Page 358 and 359:
Page 360 and 361:
Page 362 and 363:
Page 364 and 365:
Page 366 and 367:
Page 368 and 369:
Page 370 and 371:
Page 372 and 373:
Page 374 and 375:
Page 376 and 377:
Page 378 and 379:
Page 380 and 381:
Page 382:
show all

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach