LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

More documents

Recommendations

Info

Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Průtoková injekční analýza s elektrochemickým detektorem. Nejdříve bylo nezbytné zjistit elektrochemickou aktivitu studovaných látek na průtokovém elektrochemickém detektoru (ED). Jako mobilní fázi jsme použili Britton-Robinson pufr o pH 1,81. Prvním krokem bylo sestrojení hydrodynamických voltamogramů (závislost intenzity elektrochemického signálu na potenciálu pracovní elektrody – obr. 3A). Zjistili jsme, že všechny studované látky poskytují na průtokovém ED signál (obr. 3A). Pozorovaný efekt pravděpodobně souvisí s coulometrickým způsobem detekce, tzn. že látka přicházející na detektor je plně oxidována. Jako nejvhodnější potenciál pro stanovení všech studovaných kyselin byl zvolen potenciál 1 000 mV. Odpověď na elektrochemickém detektoru je velmi závislá na průtokové rychlosti, která udává dobu prekoncentrace analytu na povrchu pracovní elektrody. Průtoková rychlost byla studována v rozsahu 0,4 – 5,0 ml/min. S rostoucí rychlostí průtoku rostla jednak proudová odezva ED, ale také symetrie píků (obr. 3B). Jako nejvhodnější byl zvolen průtok 2,5 ml/min, kdy při dalším zvyšování průtoku nedochází k velkým výškovým změnám. Obr. 3: Hydrodynamické voltamogramy kyseliny salicylové a jejich derivátů (A). Výška píku 102,7 μA odpovídá 100 A výška proudové odezvy (%) 100 75 50 25 0 100 SA TSA AcSA SuSA DNSA 300 500 700 900 potenciál pracovní elektrody (mV) B výška signálu (%) 100 75 50 25 0 0 2.5 5 průtok mobilní fáze (ml/min) 10 μA 0.5 min %. Závislost signálu TSA na rychlosti průtoku mobilní fáze (B). Výška píku 111,2 μA odpovídá 100 %. Podmínky stanovení: koncentrace TSA 50 μg/ml; mobilní fáze Britton-Robinson pufr pH 1,81; nástřik 5 μl; potenciál na pracovní elektrodě 1000 mV. Při zjištěných optimálních parametrech byly analyzovány jednotlivé studované sloučeniny v závislosti na jejich koncentraci (Fig. 6C). Všechny závislosti vyšly striktně lineární. Kalibrační data a vypočtené limity detekce (LOD, 3 S/N) jsou uvedena v tabulce 1. Tab. 1: kalibrační data jednotlivých analytů pro závislost plochy píku na koncentraci a limity detekce studovaná látka rovnice regrese R 2 LOD (nM) LOD (fmol) SA y = 17,811x – 1,9008 0,9980 0,195 0,977 AcSA y = 3,5721x + 0,3521 0,9987 0,527 2,63 TSA y = 7,0741x – 1,7902 0,9964 0,529 2,64 SuSA y = 4,0618x + 0,8322 0,9985 0,427 2,13 DNSA y = 0,0382x – 0,058 0,9988 50,6 253 Současným trendem je analýza sloučenin v biologických vzorcích bez složité přípravy vzorku. Proto se velmi často volí metoda stanovení s vhodným separačním systémem. Často se využívá vysokoúčinná kapalinová chromatografie. Pro chromatografickou separaci musí být v mobilní fázi přítomné nevodné rozpouštědlo, jako je acetonitril, methanol apod. V případě elektrochemické detekce přítomnost organického rozpouštědla způsobuje snižování elektrochemické odezvy pravděpodobně v důsledku zmenšení vodivosti mobilní fáze. Proto jsme v další části naší práce testovali vliv mobilní fáze (methanol nebo acetonitril) na charakter signálů studovaných analytů. 251
Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Jako vodnou složku mobilní fáze jsme použili Britton-Robinson pufr o pH 1,81. Získané závislosti výšky signálu na množství organické složky v mobilní fázi jsou ukázány na obrázku 4. Přítomnost organické složky značně snižuje signály všech studovaných kyselin. U acetonitrilu je možné pozorovat menší pokles výšek píků než v případě methanolu a to u signálů SA, TSA, AcSA a SuSA. Signál DNSA naopak se vzrůstajícím množstvím acetonitrilu rapidně klesá a již při 10 % acetonitrilu v mobilní fázi má signál poloviční výšku oproti signálu získaného při použití pouze vodné mobilní fáze (obr. 4). A 100 Acetonitril B 100 Methanol výška píku (%) 75 50 25 0 SA TSA AcSA SuSA DNSA 0 5 10 15 20 25 30 35 40 množství acetonitrilu (%) výška píku (%) 75 50 25 0 SA TSA AcSA SuSA DNSA 0 5 10 15 20 25 30 35 40 množství methanolu (%) Obr. 4: Závislost výšky signálů studovaných látek na množství organické složky (acetonitril – A; methanol – B) v mobilní fázi. Podmínky stanovení: potenciál nastavený na pracovní elektrodě 1 000 mV; další podmínky uvedeny v obrázku 3. Using of electrochemical methods for determination of salicylic acid and its derivates Key words: salicylic acid – differential pulse voltametrie – flow injection analysis – electrochemical detector Summary Study of salicylic acid and its derivates is actual problem of plant as well as animal biology. In this paper, electrochemical responses of salicylic, acetylsalicylic, 2,3-dinitrosalicylic, thiosalicylic and 5-sulphosalicylic acid were studied. Stationary electrochemical system (differential pulse voltammetry method) and also flow injection analysis coupled with CoulArray electrochemical detector were used for our study. Poděkování Práce byla podporována granty: GA ČR č. 524/04/P132, IGA MZLU 250061/2005 a FRVŠ 2348/F4a. 252
Page 4 and 5:
Vliv abiotických a biotických str
Page 6 and 7:
Page 8 and 9:
Page 10 and 11:
Page 12 and 13:
Page 14 and 15:
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
Page 36 and 37:
Page 38 and 39:
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
150 Vliv abiotických a biotických
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95:
Page 96 and 97:
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115:
Page 116 and 117:
Page 118 and 119:
Page 120 and 121:
Page 122 and 123:
Page 124 and 125:
Page 126 and 127:
Page 128 and 129:
Page 130 and 131:
Page 132 and 133:
Page 134 and 135:
Page 136 and 137:
Page 138 and 139:
Page 140 and 141:
Page 142 and 143:
Page 144 and 145:
Page 146 and 147:
Page 148 and 149:
Page 150 and 151:
Page 152 and 153:
Page 154 and 155:
Page 156 and 157:
Page 158 and 159:
Page 160 and 161:
Page 162 and 163:
Page 164 and 165:
Page 166 and 167:
Page 168 and 169:
Page 170 and 171:
Page 172 and 173:
Page 174 and 175:
Page 176 and 177:
Page 178 and 179:
Page 180 and 181:
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4
Page 182 and 183:
Page 184 and 185:
Page 186 and 187:
Vliv biotických a abiotických str
Page 188 and 189:
Page 190 and 191:
Page 192 and 193:
Page 194 and 195:
Page 196 and 197:
Page 198 and 199:
Page 200 and 201: Vliv biotických a abiotických str
Page 300 and 301:
Page 302 and 303:
Page 304 and 305:
Page 306 and 307:
Page 308 and 309:
Page 310 and 311:
Page 312 and 313:
Page 314 and 315:
Page 316 and 317:
Page 318 and 319:
Page 320 and 321:
Page 322 and 323:
Page 324 and 325:
Page 326 and 327:
Page 328 and 329:
Page 330 and 331:
Page 332 and 333:
Page 334 and 335:
Page 336 and 337:
Page 338 and 339:
Page 340 and 341:
Page 342 and 343:
Page 344 and 345:
Page 346 and 347:
Page 348 and 349:
Page 350 and 351:
Page 352 and 353:
Page 354 and 355:
Page 356 and 357:
Page 358 and 359:
Page 360 and 361:
Page 362 and 363:
Page 364 and 365:
Page 366 and 367:
Page 368 and 369:
Page 370 and 371:
Page 372 and 373:
Page 374 and 375:
Page 376 and 377:
Page 378 and 379:
Page 380 and 381:
Page 382:
show all

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach