LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

More documents

Recommendations

Info

Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 hodin, při intenzitě světelného toku 200 μEm -2 s -1 . Po osmi dnech kultivace byla voda ve vanách nahrazena roztoky o různé koncentraci kadmia (0, 50, 100, 150, 200, 400 a 500 μM) ve formě CdCl 2 . Expozice rostlin Cd trvala 6 dnů, přičemž po 24 h intervalech byly odebírány čtyři rostliny od každé pokusné varianty. Odebrané rostliny byly omyty třikrát v destilované vodě a jednou v roztoku 0,5 M EDTA, a následně rozděleny na listy a kořeny. Příprava vzorku pro stanovení thiolových sloučenin: Listy a kořeny kukuřice (průměrně 0,2 g svěží hmotnosti) byly zmraženy kapalným dusíkem z důvodu destrukce buněk. Zmražené části rostlin byly rozetřeny v třecí misce a poté byly do misky přidány 2 ml fosfátového pufru o pH 7,0. Vzniklý roztok byl homogenizován třepáním na Vortex–2 Genie po dobu 30 min při 4 °C (Scientific Industries, USA). Homogenát byl centrifugován (15 000 ot./min) 30 min při 4 °C pomocí Universal 32 R centrifugy (Hettich-Zentrifugen GmbH, Německo) /23,24/. Supernatant byl před injekcí filtrován přes membránový filtr (0,45 μm, Millipore). Vysoko účinná kapalinová chromatografie s elektrochemickou detekcí: HPLC-ED systém byl složen ze dvou chromatografických pump Model 582 ESA (ESA Inc., Chelmsford, MA) (pracovní rozsah 0,001 - 9,999 ml/min), a chromatografické kolony s reverzní fází Polaris C18A (150 × 4,6 ; 3 μm velikost částic, Varian Inc., CA, USA) a osmi-kanálového CoulArray elektrochemického detektoru (Model 5600A, ESA, USA). Detektor je složen z průtočné analytické komůrky (Model6210, ESA, USA) obsahující čtyři cely. Každá cela obsahuje jednu pracovní uhlíkovou membránovou elektrodu, dvě referentní a dvě pomocné elektrody. Chromatografická kolona a elektrochemický detektor jsou termostatovány. Vzorek (5 μl) byl injektován manuálně přes dávkovací ventil. Výsledky a diskuse V našich experimentech byly rostliny kukuřice (Zea mays) vystaveny působení 0, 50, 100, 150, 200, 400 a 500 μM CdCl 2 po dobu šesti dnů. Každý den byly odebírány rostliny (n = 4), které byly rozděleny na jednotlivé části (listy, kořen), které byly zváženy. Získané růstové křivky ukazují toxický vliv kadmia na rostliny v závislosti na aplikované koncentraci kadmia (Obr. 3). 2.00 Listy 2.00 Kořeny Svěží hmotnost (g) 1.50 1.00 0.50 0 150 400 500 0.00 0 2 4 6 Doba expozice (d) Svěží hmotnost (g) 1.50 1.00 0.50 0 150 400 500 0.00 0 2 4 6 Doba expozice(d) Obr. 3: Růstové křivky rostlin kukuřice, které byly po dobu šesti dnů vystaveny působení čtyřech různých koncentrací kadmia (0, 150, 400 a 500 μΜ). Rostliny syntetizují celou skupinu thiolových sloučenin jako ochranu před toxickým působením těžkých kovů (podmiňují vznik kyslíkových radikálů)/19/. Jednou ze skupin těchto thiolových látek jsou fytochelatiny. V získaných extraktech byl stanoven obsah thiolových sloučenin pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s elektrochemickou detekcí (HPLC-ED). V kukuřičných extraktech byla sledována změna cysteinu, GSH, GSSG a PC 2 . Obsah cysteinu u všech 293
Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 rostlin exponovaných kadmiem se vzrůstající koncentrací aplikovaného kadmia a dobou expozice vzrůstá asi o 500 – 800 % (v porovnání s kontrolou) ve čtvrtém a pátém dni experimentu. Šestý den experimentu byl pozorován mírný pokles obsahu cysteinu, což může souviset s intenzivním zapojením této látky do metabolismu rostliny právě v detoxikačním procesu (Obr. 4). 900 600 0 50 100 150 200 400 500 Cys μM Cd(II) 900 600 0 50 100 150 200 400 500 μM Cd(II) PC 2 Množství thiolu v ng/g svěží hmotnosti 300 0 1 2 3 4 5 6 Doba expozice (d) 1800 1350 0 50 100 150 μM Cd(II) 200 400 500 GSH Množství thiolu v ng/g svěží hmotnosti 300 0 600 400 1 2 3 4 5 6 Doba expozice (d) GSSG 0 50 100 150 μM Cd(II) 200 400 500 900 450 200 0 1 2 3 4 5 6 Doba expozice (d) 0 1 2 3 4 5 6 Doba expozice (d) Obr. 4: Množství sledovaných thiolových sloučenin (cystein - Cys, redukovaný glutathion - GSH, oxidovaný glutathion - GSSG a fytochelatin - PC 2 ) obsažených v rostlinách kukuřice v závislosti na době kultivace a aplikované dávce kadmia. Obsah GSH a PC 2 po celou dobu experimentu velmi rychle vzrůstal. Již v první den experimentu byl při nejvyšší aplikované koncentraci pozorovaný nárůst obsahu thiolů o více jako 200 % (v porovnání s kontrolou). Po následující dva dny kultivace se obsah GSH a PC 2 zvyšoval přibližně o 30 – 60 % v závislosti na aplikované dávce kadmia kromě kontroly (Obr. 4). Od třetího dne experimentu, byly tyto změny pozvolnější (10 – 30 %). Tento jev již souvisí s výraznou toxicitou kadmia, která ve třetím dni experimentu byla velmi dobře patrná jak na růstové křivce, tak na morfologii rostlin. Obsah GSSG v rostlinách s rostoucí aplikovanou dávkou kadmia a dobou kultivace rostl, a šestý den byl jeho obsah o 100 až 600 % vyšší v porovnání s kontrolou (Obr. 4). U aplikované dávky 294
Page 4 and 5:
Vliv abiotických a biotických str
Page 6 and 7:
Page 8 and 9:
Page 10 and 11:
Page 12 and 13:
Page 14 and 15:
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
Page 36 and 37:
Page 38 and 39:
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
150 Vliv abiotických a biotických
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95:
Page 96 and 97:
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115:
Page 116 and 117:
Page 118 and 119:
Page 120 and 121:
Page 122 and 123:
Page 124 and 125:
Page 126 and 127:
Page 128 and 129:
Page 130 and 131:
Page 132 and 133:
Page 134 and 135:
Page 136 and 137:
Page 138 and 139:
Page 140 and 141:
Page 142 and 143:
Page 144 and 145:
Page 146 and 147:
Page 148 and 149:
Page 150 and 151:
Page 152 and 153:
Page 154 and 155:
Page 156 and 157:
Page 158 and 159:
Page 160 and 161:
Page 162 and 163:
Page 164 and 165:
Page 166 and 167:
Page 168 and 169:
Page 170 and 171:
Page 172 and 173:
Page 174 and 175:
Page 176 and 177:
Page 178 and 179:
Page 180 and 181:
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4
Page 182 and 183:
Page 184 and 185:
Page 186 and 187:
Vliv biotických a abiotických str
Page 188 and 189:
Page 190 and 191:
Page 192 and 193:
Page 194 and 195:
Page 196 and 197:
Page 198 and 199:
Page 200 and 201:
Page 202 and 203:
Page 204 and 205:
Page 206 and 207:
Page 208 and 209:
Page 210 and 211:
Page 212 and 213:
Page 214 and 215:
Page 216 and 217:
Page 218 and 219:
Page 220 and 221:
Page 222 and 223:
Page 224 and 225:
Page 226 and 227:
Page 228 and 229:
Page 230 and 231:
Page 232 and 233:
Page 234 and 235:
Page 236 and 237:
Page 238 and 239:
Page 240 and 241:
Page 242 and 243: Vliv biotických a abiotických str
Page 318 and 319: Vliv abiotických a biotických str
Page 342 and 343:
Page 344 and 345:
Page 346 and 347:
Page 348 and 349:
Page 350 and 351:
Page 352 and 353:
Page 354 and 355:
Page 356 and 357:
Page 358 and 359:
Page 360 and 361:
Page 362 and 363:
Page 364 and 365:
Page 366 and 367:
Page 368 and 369:
Page 370 and 371:
Page 372 and 373:
Page 374 and 375:
Page 376 and 377:
Page 378 and 379:
Page 380 and 381:
Page 382:
show all

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach