LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

More documents

Recommendations

Info

Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 OBSAH CELKOVÝCH POLYFENOLŮ, RESVERATROLU A ANTIOXIDAČNÍ AKTIVITA V HROZNECH RÉVY VINNÉ (VITIS VINIFERA L.) Z ČESKÉHO VINAŘSKÉHO REGIONU ROKU 2003 Šulc, M. 1 – Pivec, V. 1 1 Česká zemědělská univerzita, Fakulta agrochemie, potravinových a přírodních zdrojů, Katedra chemie, Kamýcká 957, CZ-16521 Praha 6 – Suchdol Úvod Polyfenolické sloučeniny jsou nejpočetnější a všudypřítomné složky rostlin a rostlinných metabolitů. Patří mezi ně pigmenty, stavební materiál buněk, ochraňují rostlinu proti predátorům (fytoalexiny). Většinou se jedná o sekundární rostlinné metabolity. Nejznámější skupinou polyfenolických sloučenin jsou flavonoidy, stilbeny, chalkony, aurony, kumariny, xanthony, deriváty kys. skořicové a taniny. Některé z nich bývají velmi často v rostlinné COOH buňce navázány na cukerné zbytky. /3,5/ Obecně je přijímáno, že přírodní antioxidanty polyfenolického charakteru obsažené ve víně vykazují ochranné účinky proti HO OH kardiovaskulárním chorobám /1,8/. Tento efekt je veřejnosti znám pod OH pojmem „francouzský paradox“. kys. gallová Jednou z vlastností polyfenolických látek je schopnost inhibovat (angl. „scavenge“) volné radikály, což jsou části molekul s nepárovým elektronem, které vykazjí vysokou reaktivitu. Jednou z možností vzniku volného radikálu je např. známá Fentonova reakce. Fe 2+ + H 2 O 2 Fe 3+ + OH· + OH - Tyto radikály, které běžně v buňce vznikají metabolickými cestami se v důsledku biochemických cest ihned inaktivují. Nicméně spolu s industrializací a vyspíváním společnosti se do lidského organismu dostává čím dál tím více těchto volných radikálů (mezi jinými: špatné stravovací návyky, znečištěné životní prostředí, stress,…) než je buňka schopna inaktivovat /4,9,6/. Je možno konstatovat, že velký obsah volných radikálů v buňce spolupůsobí s dalšími faktory při vzniku civilizačních chorob, rakoviny a poškození buňky (např. DNA) /2,11/. Konzumací rostlinné stravy, ale i pitím vína a čaje, je možno tělu dodávat látky s antioxidační schopností a tak napomáhat inaktivaci volných radikálů /2,7,10/. Mechanismus inaktivace volných radikálů v těle a přenos polyfenolických látek ze zažívacího traktu do krevního oběhu není ještě plně objasněn, ale má se za to, že se na tomto procesu velkou měrou podílí střevní mikroflóra. Některé sloučeniny polyfenolického charakteru jsou přímo transformovány buněčným metabolismem kvasinek. Slupky bobulí hroznů významně přispívají ke zvýšení obsahu polyfenolických látek ve víně. Toto je patrné zvláště při výrobě červeného vína, kdy je mošt v přímém kontaktu se slupkami. 309
Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Klíčová slova réva vinná · Vitis vinifera L. · antioxidační aktivita · resveratrol · polyfenolické látky · antioxidanty Materiál a metodika Příprava vzorků Vzorky hroznů z vinic byly urychleně po převezení do laboratoře zpracovány oddělením slupek bobulí, semen a moštu. Semena a slupky byly následně zmrazeny na –32 o C a lyofylizovány. Z lyofylizátu byl připraven methanolický extrakt po dobu 24 hodin v Soxhletově extraktoru. Následně byl extrakt podroben měřením. Stanovení celkových polyfenolů (CP) Pro stanovení obsahu CP byla použita metoda s užitím Folin-Ciocalteauva (FC) činidla. K 1 ml vzorku v 50 ml odměrné baňce bylo přidáno 2,5 ml FC a 7,5 ml 20% roztoku uhličitanu sodného a doplněno destilovanou vodou po rysku. Vzorky byly měřeny po 2 hodinách stání na spektrofotometru Heλios γ (Spectronic Unicam, GB) při vlnové délce λ= 765 nm. Extrakty semen a slupek bobulí byly naředěny v poměru 1:50. Výsledky byly vyjádřeny jako ekvivalenty kyseliny gallové (v mg.g -1 suš. nebo mg.l -1 čerstvého moštu). Stanovení trans-resveratrolu HPLC Použili jsme HPLC s isokratickou elucí Waters TM (čerpadlo Waters TM , autosampler Waters TM 717 plus, detektor Waters TM PDA 996 UV-VIS, kolona ODS-Hypersil 250x4,6 mm, 5 μm, průtok 1 ml.min -1 . Mobilní fází byl roztok acetonitrilu s vodou (75:25, V/V) a její pH bylo upraveno na hodnotu 1,5 kys. trifluoroctovou. Detekce při λ = 307 nm. Vzorky před analýzou byly zfiltrovány filtry Spartan 0.45 μm. Kalibrace od 0,05 do 10 μg.ml -1 , detekční limit 0,034 μg.ml -1 , kritická úroveň signálu 0,017 μg.ml -1 . Stanovení antioxidační aktivity Antioxidační aktivita byla stanovena měřením schopnosti antioxidačních látek inaktivovat roztok radikálů 2,2-difenyl-1-picrylhydrazylu (DPPH·), což se projeví odbarvením roztoku. Byl připraven methanolický roztok DPPH· o koncentraci 25 mg.l -1 . K měření absorbance byl použit spektrofotometr Heλios γ (Spectronic Unicam, GB) a vlnová délka 515 nm (absorbční maximum DPPH·). Každý vzorek byl měřen při 7 opakováních. Kyvety byly použity plastové, jednorázové (10 mm). Do každé kyvety bylo odměřeny 3 ml roztoku DPPH· o výše uvedené koncentraci a změřena počáteční absorbance v čase t 0 . Dále byl k roztoku radikálu DPPH· odpipetován vzorek o objemu 5 μl, důkladně promíchán a po 5 minutách (v čase t 5 ) byla opět změřena absorbance. Procento nedeaktivovaného radikálu DPPH· bylo vypočteno: % inaktivace = 100 – (A t5 /A t0 ). Výsledky jsou uvedeny jako % inaktivace a přepočteny na koncentraci standardu vitaminu C (mg.ml -1 ), který by poskytl stejnou inaktivaci jako studovaný vzorek. Statistické vyhodnocení Statistické vyhodnocení bylo provedeno analýzou ANOVA v programu Statgraphic na hladině významnosti α = 0,05. 310
Page 4 and 5:
Vliv abiotických a biotických str
Page 6 and 7:
Page 8 and 9:
Page 10 and 11:
Page 12 and 13:
Page 14 and 15:
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
Page 36 and 37:
Page 38 and 39:
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
150 Vliv abiotických a biotických
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95:
Page 96 and 97:
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115:
Page 116 and 117:
Page 118 and 119:
Page 120 and 121:
Page 122 and 123:
Page 124 and 125:
Page 126 and 127:
Page 128 and 129:
Page 130 and 131:
Page 132 and 133:
Page 134 and 135:
Page 136 and 137:
Page 138 and 139:
Page 140 and 141:
Page 142 and 143:
Page 144 and 145:
Page 146 and 147:
Page 148 and 149:
Page 150 and 151:
Page 152 and 153:
Page 154 and 155:
Page 156 and 157:
Page 158 and 159:
Page 160 and 161:
Page 162 and 163:
Page 164 and 165:
Page 166 and 167:
Page 168 and 169:
Page 170 and 171:
Page 172 and 173:
Page 174 and 175:
Page 176 and 177:
Page 178 and 179:
Page 180 and 181:
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4
Page 182 and 183:
Page 184 and 185:
Page 186 and 187:
Vliv biotických a abiotických str
Page 188 and 189:
Page 190 and 191:
Page 192 and 193:
Page 194 and 195:
Page 196 and 197:
Page 198 and 199:
Page 200 and 201:
Page 202 and 203:
Page 204 and 205:
Page 206 and 207:
Page 208 and 209:
Page 210 and 211:
Page 212 and 213:
Page 214 and 215:
Page 216 and 217:
Page 218 and 219:
Page 220 and 221:
Page 222 and 223:
Page 224 and 225:
Page 226 and 227:
Page 228 and 229:
Page 230 and 231:
Page 232 and 233:
Page 234 and 235:
Page 236 and 237:
Page 238 and 239:
Page 240 and 241:
Page 242 and 243:
Page 244 and 245:
Page 246 and 247:
Page 248 and 249:
Page 250 and 251:
Page 252 and 253:
Page 254 and 255:
Page 256 and 257:
Page 258 and 259: Vliv biotických a abiotických str
Page 318 and 319: Vliv abiotických a biotických str
Page 358 and 359:
Page 360 and 361:
Page 362 and 363:
Page 364 and 365:
Page 366 and 367:
Page 368 and 369:
Page 370 and 371:
Page 372 and 373:
Page 374 and 375:
Page 376 and 377:
Page 378 and 379:
Page 380 and 381:
Page 382:
show all

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach