06.02.2014 Views

Liečivé rastliny v meniacich sa environmentálnych podmienkach

Liečivé rastliny v meniacich sa environmentálnych podmienkach

Liečivé rastliny v meniacich sa environmentálnych podmienkach

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Vliv biotických a abiotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005<br />

Nicotiana tabacum L. cv. SR-1) a C 4 rostlina kukuřice (Zea mays L. cv. Anjou 245). Semenáčky<br />

byly pěstovány v písku nebo perlitu se živným roztokem v kultivační komoře při 16-h fotoperiodě,<br />

ozářenosti 250 μmol m -2 s -1 , teplotě 25/20 °C a relativní vlhkosti asi 50 %. Vodní stres byl<br />

indukován přerušením zálivky. V době, kdy bylo do<strong>sa</strong>ženo viditelné vadnutí a 2 dny po opětovném<br />

zalití byly odebrány vzorky listového pletiva (pro každou variantu 3 × 1 g a 3 × 2 g; směsné vzorky<br />

z listů 3 rostlin) a zmrazeny v tekutém dusíku. Jako charakteristika vodního stresu byl měřen<br />

relativní ob<strong>sa</strong>h vody terčíkovou metodou podle Čatského (1960).<br />

Pro stanovení ob<strong>sa</strong>hu endogenní ABA byl rostlinný materiál extrahován v metanolu a vzorky<br />

byly přečištěny a derivatizovány diazometanem. Tritiovaná (±)-ABA byla používána jako interní<br />

standard. Vzorky byly dále přečištěny pomocí sloupcové chromatografie (Polyclar AT). ABA byla<br />

analyzována pomocí plynové chromatografie (Hewlett Packard 5980 vybavený ECD, kolona OV-1,<br />

teploty na nástřiku 250 °C, koloně 210 °C, detektoru 280 °C, dusík jako nosný plyn) (Vágner et al.<br />

1998).<br />

Pro analýzu endogenních CK bylo zmrzlé pletivo rozdrceno v kapalném dusíku a extrahováno<br />

při -20 °C roztokem podle Bieleski (1964). Do extrakční směsi byly přidány deuteriem značené CK<br />

jako interní standardy. Po přečištění extraktu pomocí C 18 SPE kolonek a DEAE celulosy<br />

kombinovaného se současnou úpravou pH a rozkladem fosfátů byla získána frakce ob<strong>sa</strong>hující base,<br />

ribosidy a glukosidy a frakce z fosfátů vzniklých ribosidů. Ob<strong>sa</strong>h jednotlivých CK byl poté<br />

stanoven pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie spojené s hmotnostním spektrometrem<br />

(podrobný postup viz. Lexa et al. 2003). Pro zjednodušení interpretace do<strong>sa</strong>žených výsledků byly<br />

CK rozděleny do 5 skupin s rozdílnou biologickou funkcí podobně jako v recentní práci Ananieva<br />

et al. (2004): 1) biologicky aktivní cytokininy (trans-zeatin, dihydrozeatin, trans-zeatin-9-ribosid,<br />

dihydrozeatin-9-ribosid, isopentenyladenin, isopentenyladenin-9-ribosid), 2) cis-deriváty zeatinu<br />

(cis-zeatin, cis-zeatin-9-ribosid), 3) zásobní cytokininy (trans-zeatin-O-glucosid, trans-zeatin-9-<br />

ribosid-O-glucosid, dihydrozeatin-9-ribosid-O-glucosid), 4) neaktivní cytokininy (trans-zeatin-7-<br />

glucosid, dihydrozeatin-7-glucosid, trans-zeatin-9-glucosid, dihydrozeatin-9-glucosid,<br />

isopentenyladenin-7-glucosid, isopentenyladenin-9-glucosid) a 5) fosfáty cytokininů.<br />

Výsledky a diskuse<br />

Kukuřice je díky nižší vodivosti průduchů, vyšší efektivitě využití vody a vyšší rychlosti<br />

fotosyntézy při nízké vnitřní koncentraci CO 2 více odolná vůči vodnímu stresu než C 3 rostliny (viz<br />

přehled Matsuoka et al. 2001). Abychom zajistili podobnou rychlost snižování ob<strong>sa</strong>hu vody, použili<br />

jsme rostliny kukuřice s větší listovou plochou než měly ostatní rostliny při stejném objemu<br />

substrátu. Tím u všech čtyř druhů bylo viditelné vadnutí pozorováno 5 - 7 d po přerušení zálivky a<br />

241

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!