LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

More documents

Recommendations

Info

Vliv abiotických a biotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Silybum marianum in vitro-abiotická elicitace Lenka Tůmová 1 , Kateřina Gallová 1 , Jiří Tůma 2 , Jaroslav Dušek 1 1 Universita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, katedra farmakognosie, Heyrovského 1203, 500 05 Hradec Králové, Česká republika,tumova@faf.cuni.cz 2 Universita Hradec Králové, Pedagogická fakulta, katedra biologie, Rokytanského 62 , 500 03 Hradec Králové, jiri.tuma@uhk.cz Souhrn V kalusové kultuře Silybum marianum byl testován vliv abiotického elicitoru (5-brom-2- hydroxyfenyl)amid 5 terc.butyl-6-chlorpyrazin -2-karboxylové kyseliny na produkci flavonolignanů. Z dosažených výsledků vyplývá, že maximální tvorba flavonolignanů v kalusové kultuře nastala po použití elicitoru v koncentraci c 1 (2,59.10 -4 mol/l) a době působení 24 hodin. Úvod Hlavními obsahovými látkami Silybum marianum je skupina flavonolignanů komplexně nazývaná jako silymarin (izomerická směs obsahující silybin, izosilybin, silychristin a silydianin. K dalším flavonolignanům se řadí 2,3-dehydrosilybin, 2,3-dehydrisilychristin. Extrakty ze Silybum marianum se používají zejména k léčbě jaterních onemocnění, droga se používá jako cholagogum, choleretikum, při žloutence, posthepatickém syndromu, akutních i chronických zánětech jater /1,2/. Ke zvýšení produkce obsahových látek u kultur in vitro lze použít metodu elicitace, která využívá obranných reakcí rostlin v podmínkách in vitro. Předpokladem úspěšné licitace je použití vhodného elicitoru, jeho koncentrace a optimální doba jeho působení. V předchozích pokusech u kalusové kultury Ononis arvensis L. byl zjištěn pozitivní vliv derivátů pyrazin karboxylových kyselin jako abiotických elicitorů na produkci flavonoidů /3/. Z tohoto důvodu byla proto testována látka (5-brom-2-hydroxyfenyl)amid 5 terc.butyl-6- chlorpyrazin -2-karboxylové kyseliny na produkci flavonolignanů v kalusové kultuře Silybum marianum. Cl H 3 C C H 3 CH 3 N N Br O NH OH Compound II (5-brom-2-hydroxyfenyl)amid 5 terc.butyl-6-chlorpyrazin -2-karboxylové kyseliny 323
Vliv abiotických a biotických stresorů na vlastnosti rostlin 11.5.2005 Materiál a metodika Kalusová kultura byla odvozena z kořenové části klíční rostliny Silybum marianum (L.) GAERTN. Kalusová kultura byla kultivována na mediu Murashigeho a Skooga (MS) /4/ s obsahem α-NAA 10 mg/l jako růstového regulátoru. Kultivace probíhala za normálního denního světelného režimu a pokojové teploty. K pokusům byly použity kalusové kultury v 10.-25. pasáži. Ke kalusovým kulturám byl přidán 1 ml roztoku elicitoru ve 4 různých koncentracích (c 1 -100 mg/l ; 2,59.10 -4 mol/l); (c 2 -10 mg/l ; 2,59.10 -5 mol/l); (c 3 -1,0 mg/l; 2,59.10 -6 mol/l); (c 4 -0,1 mg/l; 2,59.10 -7 mol/l). Elicitace probíhala 12, 24, 48, 72 a 168 hodin. Po uplynutí této doby byly kultury odebrány, usušeny za laboratorní teploty . Kontrolní vzorky (bez elicitace) byly odebrány po 24 a 168 hod. Obsah flavonolignanů byl stanoven metodou HPLC /5/. Ke stanovení byla použita kolona LiChrospher RP-18 250x4. Jako mobilní fáze byl použit: - čase 0-5 min gradient z vody s obsahem 0,3 % H 3 PO 4 na 50 % vodný roztok z metanolu s obsahem 0,3 % H 3 PO 4 - v čase 5-25 minut isokraticky 50 % vodný výluh metanolu s obsahem 0,3 % H 3 PO 4. Průtok byl 1,4 ml/min. Suché kalusy byly nejprve upráškovány a poté extrahovány 2 x 10 ml metanolu po dobu 10 min. Spojené výluhy byly doplněny na objem 25,0 ml. Tento roztok byl přefiltrován přes teflonový filtr o velikosti pórů 22 μl a přenesen do vialky. Takto zpracovaný vzorek byl podroben HPLC analýze. Vzorky byly sledovány při 288 nm. Identifikace obsahových látek byla provedena porovnáním retenčních časů a spekter příslušných píků vzorků se standardem silymarinu. Výsledky a diskuse Práce je zaměřena na zvýšení produkce flavonolignanů v kalusové kultuře Silybum marianum. K ovlivnění produkce flavonolignanů byl použit abiotický elicitor (5-brom-2-hydroxyfenyl)amid 5 terc.butyl-6-chlorpyrazin -2-karboxylové kyseliny. Statisticky významná produkce byla zaznamenána po 12 a 24 hodinové elicitaci při použití elicitoru v koncentraci c 1 , c 2 a c 3 . Dále u koncencentrace c 2 , c 3 a c 4 po 48 hodinové elicitaci , u koncentrace c 4 též po 72 hodinové licitaci (Fig. 1). Největší obsah flavonolignanů v kalusové kultuře po elicitaci(5-brom-2-hydroxyfenyl)amid 5 terc.butyl-6-chlorpyrazin -2-karboxylové kyseliny nastal po 24 hodinách při použití elicitoru v koncentraci c 1 (2,59.10 -4 mol/l), nárůst v obsahu činil 1039 % (Fig. 1). 324
Page 4 and 5:
Vliv abiotických a biotických str
Page 6 and 7:
Page 8 and 9:
Page 10 and 11:
Page 12 and 13:
Page 14 and 15:
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
Page 36 and 37:
Page 38 and 39:
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
150 Vliv abiotických a biotických
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95:
Page 96 and 97:
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115:
Page 116 and 117:
Page 118 and 119:
Page 120 and 121:
Page 122 and 123:
Page 124 and 125:
Page 126 and 127:
Page 128 and 129:
Page 130 and 131:
Page 132 and 133:
Page 134 and 135:
Page 136 and 137:
Page 138 and 139:
Page 140 and 141:
Page 142 and 143:
Page 144 and 145:
Page 146 and 147:
Page 148 and 149:
Page 150 and 151:
Page 152 and 153:
Page 154 and 155:
Page 156 and 157:
Page 158 and 159:
Page 160 and 161:
Page 162 and 163:
Page 164 and 165:
Page 166 and 167:
Page 168 and 169:
Page 170 and 171:
Page 172 and 173:
Page 174 and 175:
Page 176 and 177:
Page 178 and 179:
Page 180 and 181:
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4
Page 182 and 183:
Page 184 and 185:
Page 186 and 187:
Vliv biotických a abiotických str
Page 188 and 189:
Page 190 and 191:
Page 192 and 193:
Page 194 and 195:
Page 196 and 197:
Page 198 and 199:
Page 200 and 201:
Page 202 and 203:
Page 204 and 205:
Page 206 and 207:
Page 208 and 209:
Page 210 and 211:
Page 212 and 213:
Page 214 and 215:
Page 216 and 217:
Page 218 and 219:
Page 220 and 221:
Page 222 and 223:
Page 224 and 225:
Page 226 and 227:
Page 228 and 229:
Page 230 and 231:
Page 232 and 233:
Page 234 and 235:
Page 236 and 237:
Page 238 and 239:
Page 240 and 241:
Page 242 and 243:
Page 244 and 245:
Page 246 and 247:
Page 248 and 249:
Page 250 and 251:
Page 252 and 253:
Page 254 and 255:
Page 256 and 257:
Page 258 and 259:
Page 260 and 261:
Page 262 and 263:
Page 264 and 265:
Page 266 and 267:
Page 268 and 269:
Page 270 and 271:
Page 272 and 273: Vliv biotických a abiotických str
Page 318 and 319: Vliv abiotických a biotických str
Page 372 and 373:
Page 374 and 375:
Page 376 and 377:
Page 378 and 379:
Page 380 and 381:
Page 382:
show all

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?

LieÃ„ÂivÃƒÂ© rastliny v meniacich sa environmentÃƒÂ¡lnych podmienkach