03.12.2012 Views

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

IV Deo: Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> 189<br />

- }elijsko sazrevanje, remodeliranje membrane<br />

i njihov doprinos funkciji oplodnje<br />

spermatozoida;<br />

- veza izme|u spermatozoida i hromozomskih<br />

aneuploidnosti;<br />

- relativne efikasnosti gustinskog gradijenta<br />

i swim-up metode pri eliminisanju<br />

aneuploidnih i diploidnih spermatozoida;<br />

- upotreba vezivanja HA - hyaluronic<br />

acid- a pri selekciji pojedina~nih zrelih spermatozoida<br />

sa niskim nivoima hromozomskih<br />

aneuploidnosti i degradacije DNK -<br />

deoksiribonukleinske kiseline (DNA - deoxyribonucleic<br />

acid).<br />

Zadr`avanje citoplazme kao markera<br />

nezrelosti spermatozoida i drugi biohemijski<br />

markeri }elijskog sazrevanja spermatozoida<br />

imaju posebnu va`nost kao objektivni<br />

biohemijski markeri zrelosti koji bi<br />

predvideli mu{ku plodnost nezavisno od<br />

tradicionalnih kriterijuma koncentracije<br />

spermatozoida i njihove pokretljivosti.<br />

U merenjima spermatozoidne kreatin-<br />

N-fosfotransferaze ili CK - kreatin kinaze<br />

otkriveno je zna~ajno ve}i nivo aktivnosti<br />

CK - kreatin kinaze spermatozoida kod mu{karaca<br />

sa smanjenom fertilno{cu. [abloni<br />

imuno bojenja kreatin kinaze su pokazali<br />

da je visoka aktivnost CK - kreatin kinaze<br />

spermatozoida direktna posledica pove}anih<br />

koncentracija proteina citoplazme i CK<br />

- kreatin kinaze u samom spermatozoidu.<br />

U analizi elektroforezom ekstrakta ljudske<br />

sperme na|en je jo{ jedan protein koji<br />

sadr`i ATP - adenosine triphosphate i koji<br />

je bio u srazmeri sa pojavljivanjem zrelih<br />

spermatozoida, koje karakteri{e niska<br />

aktivnost CK - kreatin kinaze i nezadr`avanje<br />

citoplazme. Nedavno je identifikovan<br />

ovaj razvojno regulisani protein kao 70<br />

kDa prate}i protein koji je nazvan HspA2 -<br />

recombinant protein - heat shock 70kDa<br />

protein 2. Bliska inverzna korelacija izme|u<br />

broja spermatozoida sa zadr`avanjem citoplazme<br />

i odnosa HspA2 - rekombinantni<br />

protein je pokazala da su eliminacija citoplazme<br />

i po~etak sinteze me|usobno<br />

povezani. Ovaj protein se pokazao kao<br />

najkorisiji objektivni biohemijski marker.<br />

U spermatogenezi istovremeno sa eliminacijom<br />

citoplazme i po~etkom sinteze<br />

HspA2 - proteina, membrana spermatozoida<br />

prolazi kroz remodeliranje vezano za<br />

sazrevanje. Ovaj korak remodeliranja olak-<br />

{ava formiranje receptora koji slu`e za<br />

vezivanje za zonu pellucidu i za vezivanje<br />

hialuronske kiseline kod zrelih spermatozoida.<br />

Nezreli spermatozoidi imaju povi-<br />

{ene stepene peroksidacije lipida .<br />

Utvr|eno je u daljim studijama da se svi<br />

doga|aji tokom sazrevanja spermatozoida,<br />

koji su u vezi sa padom aktivnosti CK -<br />

kreatin kinaze i pove}anjem ekspresije<br />

HspA2 - recombinant protein zavr{avaju do<br />

trenutka kada spermatozoidi u|u u epididimis.<br />

]elijsko sazrevanje i remodeliranje<br />

membrane imaju uticaja na funkciju oplodnje.<br />

Prediktivne vrednosti aktivnosti<br />

kreatin kinaze koja predstavlja zadr`avanje<br />

citoplazme je testirana kod parova le~enih<br />

intrauterinom inseminacijom kod kojih je<br />

suprug bio oligospermi~an. U svim slu~ajevima<br />

identi~ne koncentracije spermatozoida<br />

i parametara pokretljivosti postojala je<br />

~etvorostruko ni`a aktivnost kreatin kinaze<br />

spermatozoida parova kod kojih je do{lo do<br />

trudno}e.<br />

U studijima je potvr|eno da su samo<br />

zreli spermatozoidi sa niskom kreatin kinazom<br />

bili sposobni da se ve`u za zonu pelucidu.<br />

Spermatozoidi sa zadr`anom citoplazmom<br />

se nisu vezivali za oocite. U daljem<br />

prou~avanju se pokazalo da se remodeliranje<br />

membrane kod spermatozoida<br />

odvija istovremeno sa istiskivanjem citoplazme

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!