asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
IV Deo: Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> 189<br />
- }elijsko sazrevanje, remodeliranje membrane<br />
i njihov doprinos funkciji oplodnje<br />
spermatozoida;<br />
- veza izme|u spermatozoida i hromozomskih<br />
aneuploidnosti;<br />
- relativne efikasnosti gustinskog gradijenta<br />
i swim-up metode pri eliminisanju<br />
aneuploidnih i diploidnih spermatozoida;<br />
- upotreba vezivanja HA - hyaluronic<br />
acid- a pri selekciji pojedina~nih zrelih spermatozoida<br />
sa niskim nivoima hromozomskih<br />
aneuploidnosti i degradacije DNK -<br />
deoksiribonukleinske kiseline (DNA - deoxyribonucleic<br />
acid).<br />
Zadr`avanje citoplazme kao markera<br />
nezrelosti spermatozoida i drugi biohemijski<br />
markeri }elijskog sazrevanja spermatozoida<br />
imaju posebnu va`nost kao objektivni<br />
biohemijski markeri zrelosti koji bi<br />
predvideli mu{ku plodnost nezavisno od<br />
tradicionalnih kriterijuma koncentracije<br />
spermatozoida i njihove pokretljivosti.<br />
U merenjima spermatozoidne kreatin-<br />
N-fosfotransferaze ili CK - kreatin kinaze<br />
otkriveno je zna~ajno ve}i nivo aktivnosti<br />
CK - kreatin kinaze spermatozoida kod mu{karaca<br />
sa smanjenom fertilno{cu. [abloni<br />
imuno bojenja kreatin kinaze su pokazali<br />
da je visoka aktivnost CK - kreatin kinaze<br />
spermatozoida direktna posledica pove}anih<br />
koncentracija proteina citoplazme i CK<br />
- kreatin kinaze u samom spermatozoidu.<br />
U analizi elektroforezom ekstrakta ljudske<br />
sperme na|en je jo{ jedan protein koji<br />
sadr`i ATP - adenosine triphosphate i koji<br />
je bio u srazmeri sa pojavljivanjem zrelih<br />
spermatozoida, koje karakteri{e niska<br />
aktivnost CK - kreatin kinaze i nezadr`avanje<br />
citoplazme. Nedavno je identifikovan<br />
ovaj razvojno regulisani protein kao 70<br />
kDa prate}i protein koji je nazvan HspA2 -<br />
recombinant protein - heat shock 70kDa<br />
protein 2. Bliska inverzna korelacija izme|u<br />
broja spermatozoida sa zadr`avanjem citoplazme<br />
i odnosa HspA2 - rekombinantni<br />
protein je pokazala da su eliminacija citoplazme<br />
i po~etak sinteze me|usobno<br />
povezani. Ovaj protein se pokazao kao<br />
najkorisiji objektivni biohemijski marker.<br />
U spermatogenezi istovremeno sa eliminacijom<br />
citoplazme i po~etkom sinteze<br />
HspA2 - proteina, membrana spermatozoida<br />
prolazi kroz remodeliranje vezano za<br />
sazrevanje. Ovaj korak remodeliranja olak-<br />
{ava formiranje receptora koji slu`e za<br />
vezivanje za zonu pellucidu i za vezivanje<br />
hialuronske kiseline kod zrelih spermatozoida.<br />
Nezreli spermatozoidi imaju povi-<br />
{ene stepene peroksidacije lipida .<br />
Utvr|eno je u daljim studijama da se svi<br />
doga|aji tokom sazrevanja spermatozoida,<br />
koji su u vezi sa padom aktivnosti CK -<br />
kreatin kinaze i pove}anjem ekspresije<br />
HspA2 - recombinant protein zavr{avaju do<br />
trenutka kada spermatozoidi u|u u epididimis.<br />
]elijsko sazrevanje i remodeliranje<br />
membrane imaju uticaja na funkciju oplodnje.<br />
Prediktivne vrednosti aktivnosti<br />
kreatin kinaze koja predstavlja zadr`avanje<br />
citoplazme je testirana kod parova le~enih<br />
intrauterinom inseminacijom kod kojih je<br />
suprug bio oligospermi~an. U svim slu~ajevima<br />
identi~ne koncentracije spermatozoida<br />
i parametara pokretljivosti postojala je<br />
~etvorostruko ni`a aktivnost kreatin kinaze<br />
spermatozoida parova kod kojih je do{lo do<br />
trudno}e.<br />
U studijima je potvr|eno da su samo<br />
zreli spermatozoidi sa niskom kreatin kinazom<br />
bili sposobni da se ve`u za zonu pelucidu.<br />
Spermatozoidi sa zadr`anom citoplazmom<br />
se nisu vezivali za oocite. U daljem<br />
prou~avanju se pokazalo da se remodeliranje<br />
membrane kod spermatozoida<br />
odvija istovremeno sa istiskivanjem citoplazme