asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
278 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
Va`no je ista}i da odre|ena koli~ina vode<br />
ostaje vezana za molekularne strukture i da<br />
se ne elimini{e u toku procesa dehidratacije.<br />
Isto tako, smanjenjem temperature<br />
ekstracelularni rastvor trpi fizi~ke i hemijske<br />
promene, a osmolarnost raste. Pove-<br />
}anje koncentracije ekstracelularne soli<br />
rezultira daljim osmotskim izvla~enjem<br />
vode iz }elije, {to ima za posledicu pasivnu<br />
dehidrataciju. Ekscesivna i nekontrolisana<br />
redukcija }elijskog volumena mo`e da<br />
dovede do ireverzibilnog o{te}enja }elijskog<br />
citoskeleta.<br />
Drugi va`an problem u vezi sa krioprezervacijom<br />
je formiranje kristala leda.<br />
Imaju}i u vidu da jedan deo vode ostaje u<br />
}eliji, postoji opasnost da }e smanjenjem<br />
temperature i formiranjem kristala leda oni<br />
o{tetiti prvenstveno plasma membranu i<br />
druge membranozne elemente.<br />
Nije definitivno odre|eno koliko dugo<br />
humani oocit, odnosno embrion, mo`e da<br />
bude zamrznut. Pre`ivljavanje nakon krioprezervacije<br />
je zavisno od kvaliteta promena<br />
u toku procesa zamrzavanja, odnosno<br />
odmrzavanja, dok je sam period deponovanja<br />
od sekundarnog zna~aja.<br />
Najdu`i period ~uvanja humanog embriona,<br />
objavljen u literaturi, koji je rezultirao<br />
ro|enjem zdrave bebe nakon transfera<br />
odmrznutog embriona iznosio je 12 godina.<br />
Konvencionalno zamrzavanje<br />
humanih oocita<br />
Iako su objavljeni rezultati uspe{nog<br />
zamrzavanja oocita, sveukupni rezultati<br />
pokazuju ograni~enu primenu krioprezervacije<br />
oocita u klini~koj praksi. Oocit u<br />
drugoj metafazi pokazuje posebnu<br />
osetljivost na niske temperature. Ovo mo`e<br />
da bude posledica poreme}aja na nivou<br />
deobnog vretena ili mitohondrijalnih membrana,<br />
ili promena na nivou zone pelucide.<br />
Problem u vezi sa o{te}enjem deobnog<br />
vretena mo`e se zaobi}i pode{avanjem<br />
intervala izme|u odmrzavanja oocita i ICSI<br />
- intra citoplasmatic sperm injection postupka,<br />
~ime se omogu}ava citoskeletu<br />
oocita da se remodelira i obnovi deobno<br />
vreteno. Pove}ana osteljivost oocita mo`e<br />
se objasniti smanjenom permeabilno{}u<br />
citoplazmatske membrane, kao pove}anom<br />
osetljivo{}u na osmotske promene.<br />
Zamrzavanje oocita u GV - germinal vesicle<br />
stadijumu gde je DNK - deoksiribonukleinska<br />
kiselina okru`ena nuklearnom<br />
mebranom, otkriva nove probleme u smislu<br />
IVM - in vitro maturation.<br />
Tucker je 1998. godine objavio prvu<br />
trudno}u iz krioprezervisanih GV - germinal<br />
vesicle faze oocita. Bilo je krioprezervisano<br />
ukupno 29 oocita, ali je samo tri<br />
oocita u GV- germinal vesicle fazi pre`ivelo.<br />
Nakon 30 ~asova kultivacije, dva oocita su<br />
sazrela i bili su oplo|eni ICSI - intra citoplasmatic<br />
sperm injection tehnikom.<br />
ICSI - intra citoplasmatic sperm injection<br />
koja se koristi u postupku fertilizacije<br />
oocita nakon odmrzavanja, premo{}uje<br />
problem o~vr{}avanja zone nakon procesa<br />
krioprezervacije.<br />
I pored opisanih trudno}a, procenat<br />
uspe{ne fertilizacije i formiranja blastociste<br />
je samo oko 5,6%, a procenat trudno}e je<br />
manji od 10%.<br />
Ipak, sve bolji rezultati ukazuju da zamrzavanje<br />
oocita mo`e da bude alternativna<br />
metoda zamrzavanju embriona, posebno<br />
ako se imaju u vidu slu~ajevi oocit donor<br />
programa, oboljenja pra}ena gubitkom<br />
ovarijalnog tkiva, ili u slu~ajevima kada je<br />
nemogu}e zamrznuti embrione.<br />
Krioprezervacija nezrelih oocita<br />
Prikupljanje nezrelih oocita skra}uje<br />
fazu rasta oocita i proliferativnu fazu