03.12.2012 Views

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

278 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />

Va`no je ista}i da odre|ena koli~ina vode<br />

ostaje vezana za molekularne strukture i da<br />

se ne elimini{e u toku procesa dehidratacije.<br />

Isto tako, smanjenjem temperature<br />

ekstracelularni rastvor trpi fizi~ke i hemijske<br />

promene, a osmolarnost raste. Pove-<br />

}anje koncentracije ekstracelularne soli<br />

rezultira daljim osmotskim izvla~enjem<br />

vode iz }elije, {to ima za posledicu pasivnu<br />

dehidrataciju. Ekscesivna i nekontrolisana<br />

redukcija }elijskog volumena mo`e da<br />

dovede do ireverzibilnog o{te}enja }elijskog<br />

citoskeleta.<br />

Drugi va`an problem u vezi sa krioprezervacijom<br />

je formiranje kristala leda.<br />

Imaju}i u vidu da jedan deo vode ostaje u<br />

}eliji, postoji opasnost da }e smanjenjem<br />

temperature i formiranjem kristala leda oni<br />

o{tetiti prvenstveno plasma membranu i<br />

druge membranozne elemente.<br />

Nije definitivno odre|eno koliko dugo<br />

humani oocit, odnosno embrion, mo`e da<br />

bude zamrznut. Pre`ivljavanje nakon krioprezervacije<br />

je zavisno od kvaliteta promena<br />

u toku procesa zamrzavanja, odnosno<br />

odmrzavanja, dok je sam period deponovanja<br />

od sekundarnog zna~aja.<br />

Najdu`i period ~uvanja humanog embriona,<br />

objavljen u literaturi, koji je rezultirao<br />

ro|enjem zdrave bebe nakon transfera<br />

odmrznutog embriona iznosio je 12 godina.<br />

Konvencionalno zamrzavanje<br />

humanih oocita<br />

Iako su objavljeni rezultati uspe{nog<br />

zamrzavanja oocita, sveukupni rezultati<br />

pokazuju ograni~enu primenu krioprezervacije<br />

oocita u klini~koj praksi. Oocit u<br />

drugoj metafazi pokazuje posebnu<br />

osetljivost na niske temperature. Ovo mo`e<br />

da bude posledica poreme}aja na nivou<br />

deobnog vretena ili mitohondrijalnih membrana,<br />

ili promena na nivou zone pelucide.<br />

Problem u vezi sa o{te}enjem deobnog<br />

vretena mo`e se zaobi}i pode{avanjem<br />

intervala izme|u odmrzavanja oocita i ICSI<br />

- intra citoplasmatic sperm injection postupka,<br />

~ime se omogu}ava citoskeletu<br />

oocita da se remodelira i obnovi deobno<br />

vreteno. Pove}ana osteljivost oocita mo`e<br />

se objasniti smanjenom permeabilno{}u<br />

citoplazmatske membrane, kao pove}anom<br />

osetljivo{}u na osmotske promene.<br />

Zamrzavanje oocita u GV - germinal vesicle<br />

stadijumu gde je DNK - deoksiribonukleinska<br />

kiselina okru`ena nuklearnom<br />

mebranom, otkriva nove probleme u smislu<br />

IVM - in vitro maturation.<br />

Tucker je 1998. godine objavio prvu<br />

trudno}u iz krioprezervisanih GV - germinal<br />

vesicle faze oocita. Bilo je krioprezervisano<br />

ukupno 29 oocita, ali je samo tri<br />

oocita u GV- germinal vesicle fazi pre`ivelo.<br />

Nakon 30 ~asova kultivacije, dva oocita su<br />

sazrela i bili su oplo|eni ICSI - intra citoplasmatic<br />

sperm injection tehnikom.<br />

ICSI - intra citoplasmatic sperm injection<br />

koja se koristi u postupku fertilizacije<br />

oocita nakon odmrzavanja, premo{}uje<br />

problem o~vr{}avanja zone nakon procesa<br />

krioprezervacije.<br />

I pored opisanih trudno}a, procenat<br />

uspe{ne fertilizacije i formiranja blastociste<br />

je samo oko 5,6%, a procenat trudno}e je<br />

manji od 10%.<br />

Ipak, sve bolji rezultati ukazuju da zamrzavanje<br />

oocita mo`e da bude alternativna<br />

metoda zamrzavanju embriona, posebno<br />

ako se imaju u vidu slu~ajevi oocit donor<br />

programa, oboljenja pra}ena gubitkom<br />

ovarijalnog tkiva, ili u slu~ajevima kada je<br />

nemogu}e zamrznuti embrione.<br />

Krioprezervacija nezrelih oocita<br />

Prikupljanje nezrelih oocita skra}uje<br />

fazu rasta oocita i proliferativnu fazu

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!