03.12.2012 Views

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

264 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />

Ovi enzimi katali{u reverzibilno uklanjanje<br />

dva jona vodonika konvertuju}i<br />

aktivni steroidni kortizol sa njegovim inertnim<br />

metabolitom kortizonom kao {to je<br />

prikazano na prethodnoj slici.<br />

Po~etkom 90-ih godina enzimska oksidacija<br />

kortizola u kortizon je prvi put otkrivena<br />

kod humanih granuloza - luteinskih<br />

}elija aspiriranih iz folikula `ena koje su se<br />

podvrgle IVF - in vitro fertilisation.<br />

Sl. 4.73- β11 HSD - 11β-hydroxysteroid<br />

dehydrogenaze mRNK - messenger ribonucleic<br />

acid ovarijuma in situ hibridizacija: T - tekalne<br />

ovarijalne }elije; G - granulozne }elije<br />

Ubrzo nakon toga pojavio se rad o<br />

potencijalno prediktivnoj vezi izme|u stepena<br />

oksidacije kortizola u kojoj posreduje<br />

β11 HSD - β11 - hydroxysteroid dehydrogenaze<br />

i ishoda IVF - in vitro fertilisation.<br />

U studijama o aktivnosti enzima 11<br />

βHSD - 11β -hydroxysteroid dehydrogenaze<br />

su odre|ivane, in vitro kvantifikacijom,<br />

neto oksidacije 3 H-kortizola u 3 H -<br />

kortizon tokom 4 ~asa. Dok su }elije kod<br />

2/3 pacijenata ispoljavale umerene i visoke<br />

nivoe aktivnosti 11β HSD -11β -hydroxysteroid<br />

dehydrogenaze enzima, kod 1/3<br />

pacijenata }elije su imale veoma niske<br />

nivoe aktivnosti 11β HSD - 11β -hydroxysteroid<br />

dehydrogenaze, ispod granice detekcije.<br />

S obzirom na to, da kod nijednog od<br />

pacijenata, sa ovarijalnom aktivno{}u 11<br />

β HSD -11 -hydroxysteroid dehydrogenaze<br />

koja se mo`e detektovati, nije kasnije do{lo<br />

do za~e}a, niski nivoi aktivnosti enzima 11<br />

β HSD - 11β - hydroxysteroid dehydrogenaze<br />

su dovedeni u vezu sa procentom<br />

trudno}e od 64%. Posle objavljivanja ovih<br />

ohrabruju}ih podataka, dve nezavisne<br />

istra`iva~ke grupe su ispitivale ovu potencijalno<br />

prediktivnu vezu. Iako ni jedna od<br />

ovih grupa nije na{la zna~ajnu korelaciju<br />

izme|u ovarijalne aktivnosti 11β HSD - 11β -<br />

hydroxysteroid dehydrogenaze i ishoda<br />

IVF - in vitro fertilisation, prethodna studija<br />

je pokazala da su srednje vrednosti metabolizma<br />

kortizola najmanje u onim ciklusima<br />

koji su rezultovali trudno}om, a najvi{i u<br />

ciklusima sa neuspe{nom fertilizacijom.<br />

Umerene vrednosti aktivnosti enzima su<br />

bile u ciklusima u kojima nije bilo za~e}a.<br />

Razlike u metodama kori{}enim za procenu<br />

ovarijalne aktivnosti 11β HS - D11β -<br />

hydroxysteroid dehydrogenaze su imale<br />

uticaj na rezultate ove korelacije. Na<br />

primer, u jednoj studiji granulozne }elije su<br />

bile zamrznute u vreme folikularne<br />

aspiracije, a aktivnost enzima je kasnije<br />

ispitivana kod odmrznutih }elija. Podaci<br />

jednog broja laboratorija ukazuju da su 11<br />

β HSD - 11 β - hydroxysteroid dehydrogenaze<br />

enzimi osetljivi na proceduru krioprezervacije,<br />

pa je ovo moglo ugroziti<br />

merenja ovarijalnih aktivnosti 11β HSD -<br />

11β -hydroxysteroid dehydrogenaze.<br />

U inicijalnim studijama ovarijalne<br />

aktivnosti 11β HSD - 11β - hydroxysteroid<br />

dehydrogenaze medijum je ~uvan pri temperaturi<br />

od 4° C tokom tri dana pre upotrebe.<br />

Posle separacije u Percoll-u granulozne<br />

}elije su kultivisane tokom tri dana u medijumu<br />

sa dodatnim serumom radi olak{avanja<br />

ponovnog formiranja luteiniziranog<br />

fenotipa pre procene aktivnosti 11 βHSD -<br />

11β - hydroxysteroid dehydrogenaze, koja<br />

je ra|ena ~etvrtog dana kultivacije.

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!