asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
264 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
Ovi enzimi katali{u reverzibilno uklanjanje<br />
dva jona vodonika konvertuju}i<br />
aktivni steroidni kortizol sa njegovim inertnim<br />
metabolitom kortizonom kao {to je<br />
prikazano na prethodnoj slici.<br />
Po~etkom 90-ih godina enzimska oksidacija<br />
kortizola u kortizon je prvi put otkrivena<br />
kod humanih granuloza - luteinskih<br />
}elija aspiriranih iz folikula `ena koje su se<br />
podvrgle IVF - in vitro fertilisation.<br />
Sl. 4.73- β11 HSD - 11β-hydroxysteroid<br />
dehydrogenaze mRNK - messenger ribonucleic<br />
acid ovarijuma in situ hibridizacija: T - tekalne<br />
ovarijalne }elije; G - granulozne }elije<br />
Ubrzo nakon toga pojavio se rad o<br />
potencijalno prediktivnoj vezi izme|u stepena<br />
oksidacije kortizola u kojoj posreduje<br />
β11 HSD - β11 - hydroxysteroid dehydrogenaze<br />
i ishoda IVF - in vitro fertilisation.<br />
U studijama o aktivnosti enzima 11<br />
βHSD - 11β -hydroxysteroid dehydrogenaze<br />
su odre|ivane, in vitro kvantifikacijom,<br />
neto oksidacije 3 H-kortizola u 3 H -<br />
kortizon tokom 4 ~asa. Dok su }elije kod<br />
2/3 pacijenata ispoljavale umerene i visoke<br />
nivoe aktivnosti 11β HSD -11β -hydroxysteroid<br />
dehydrogenaze enzima, kod 1/3<br />
pacijenata }elije su imale veoma niske<br />
nivoe aktivnosti 11β HSD - 11β -hydroxysteroid<br />
dehydrogenaze, ispod granice detekcije.<br />
S obzirom na to, da kod nijednog od<br />
pacijenata, sa ovarijalnom aktivno{}u 11<br />
β HSD -11 -hydroxysteroid dehydrogenaze<br />
koja se mo`e detektovati, nije kasnije do{lo<br />
do za~e}a, niski nivoi aktivnosti enzima 11<br />
β HSD - 11β - hydroxysteroid dehydrogenaze<br />
su dovedeni u vezu sa procentom<br />
trudno}e od 64%. Posle objavljivanja ovih<br />
ohrabruju}ih podataka, dve nezavisne<br />
istra`iva~ke grupe su ispitivale ovu potencijalno<br />
prediktivnu vezu. Iako ni jedna od<br />
ovih grupa nije na{la zna~ajnu korelaciju<br />
izme|u ovarijalne aktivnosti 11β HSD - 11β -<br />
hydroxysteroid dehydrogenaze i ishoda<br />
IVF - in vitro fertilisation, prethodna studija<br />
je pokazala da su srednje vrednosti metabolizma<br />
kortizola najmanje u onim ciklusima<br />
koji su rezultovali trudno}om, a najvi{i u<br />
ciklusima sa neuspe{nom fertilizacijom.<br />
Umerene vrednosti aktivnosti enzima su<br />
bile u ciklusima u kojima nije bilo za~e}a.<br />
Razlike u metodama kori{}enim za procenu<br />
ovarijalne aktivnosti 11β HS - D11β -<br />
hydroxysteroid dehydrogenaze su imale<br />
uticaj na rezultate ove korelacije. Na<br />
primer, u jednoj studiji granulozne }elije su<br />
bile zamrznute u vreme folikularne<br />
aspiracije, a aktivnost enzima je kasnije<br />
ispitivana kod odmrznutih }elija. Podaci<br />
jednog broja laboratorija ukazuju da su 11<br />
β HSD - 11 β - hydroxysteroid dehydrogenaze<br />
enzimi osetljivi na proceduru krioprezervacije,<br />
pa je ovo moglo ugroziti<br />
merenja ovarijalnih aktivnosti 11β HSD -<br />
11β -hydroxysteroid dehydrogenaze.<br />
U inicijalnim studijama ovarijalne<br />
aktivnosti 11β HSD - 11β - hydroxysteroid<br />
dehydrogenaze medijum je ~uvan pri temperaturi<br />
od 4° C tokom tri dana pre upotrebe.<br />
Posle separacije u Percoll-u granulozne<br />
}elije su kultivisane tokom tri dana u medijumu<br />
sa dodatnim serumom radi olak{avanja<br />
ponovnog formiranja luteiniziranog<br />
fenotipa pre procene aktivnosti 11 βHSD -<br />
11β - hydroxysteroid dehydrogenaze, koja<br />
je ra|ena ~etvrtog dana kultivacije.