asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

IV Deo: Asistirana reproduktivna tehnologija 191
U praksi je i dualni gradijent sastavljen
od 40% i 90% rastvora podjednako efikasan u
izdvajanju normalnih spermatozoida.
U studijama koje su ra|ene analiziralo
se da li gustinski gradijenti elimini{u
nezrele spermatozoide iz delova taloga, da
li se odvajaju spermatozoidi sa hromozomskim
aneuploidijama i diploidijama iz dela
taloga i da li postoji veza izme|u pojave
nezrelih spermatozoida i spermatozoida sa
hromozomskim aneuploidijama. U studijama
je kori{}en Percoll gradijent i njegovi
derivati. Upotrebom FISH - fluorescence in
situ hybridization metodom su procenjivani
nukleusi spermatozoida, u svakoj od 20
frakcija pomo}u centromerskih sondi za
hromozome X, Y i 17, {to je prikazano na
slici br. 4.18.
U istra`ivanjima je potvr|eno da je
u~estalost hromozomskih aberacija kod
spermatozoida, kako aneuploidija tako i
diploidije, zna~ajno smanjena u 80%
Percoll talogu nasuprot inicijalnim frekvencijama
koje su odre|ivane u spermatozoidima
ejakulata.
Ovi nalazi mogu se objasniti pove}anim
brojem zrelih spermatozoida u 80% Percoll
talogu. Tako|e je sa stanovi{ta zrelosti
spermatozoida, uzorak izdvojen u talogu
homogeniji od inicijalnih uzoraka.
U~estalosti dizomije i diploidije spermatozoida
u Percoll talogu smanjene su 2,8 puta
u odnosu na inicijalni uzorak. Porede}i
odvojeno dizomije i diploidiju, mo`e se
konstatovati da je smanjenje bilo o~iglednije
kod disomija, i to, 3,3 puta u odnosu na
diploidiju, ~ije smanjenje je bilo 2,1 puta.
Dizomije su u direktnoj korelaciji sa eliminacijom
nezrelih spermatozoida iz ejakulata
u odnosu na diploidnosti.
Swim-up tehnika se ~esto koristi za
pripremu spermatozoida u metodama asistirane
reprodukcije. Uvo|enje fluoroscentne
in situ hibridizacije FISH - fluorescence
in situ hybridization sa hromozom
specifi~nim DNK - deoksiribonukleinska
kiselina sondama je olak{alo detekciju aneuploidija
X i Y hromozoma i nekih autozoma,
kao i detekciju diploidnosti. Publikacije
koje su se bavile rezultatima posle
normalan dizomija diploidija
Sl. 4.18- FISH - fluorescence in situ hybridization dekompenzovano jedro spermatozoida
(markeri centromera X, Y i 17)