03.12.2012 Views

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

IV Deo: Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> 285<br />

Faktori koji uti~u na efikasnost procesa<br />

vitrifikacije su slede}i:<br />

- tip i koncentracija krioprotektanta, jer<br />

su gotovo svi krioprotektanti toksi~ni,<br />

- medijum koji se koristi kao bazni medijum,<br />

- temperatura vitrifikacionog rastvora,<br />

- vreme za koje su }elije/tkivo izlo`ene<br />

finalnoj koncentraciji krioprotektanta pre<br />

potapanja u te~ni azot,<br />

- volumen rastvora krioprotektanta koji<br />

okru`uje }elije/tkivo,<br />

- tehni~ka obu~enost embriologa,<br />

- kvalitet i stepen razvoja }elija/tkiva,<br />

- direktni kontakt te~nog azota i vitrifikacionog<br />

rastvora koji sadr`i biolo{ki<br />

materijal mo`e biti izvor kontaminacije.<br />

Protokoli vitrifikacije su jednostavni,<br />

brzi, i relativno jeftini, imaju}i u vidu da<br />

nije potrebna skupa oprema.<br />

Sistem nosa~a<br />

Treba naglasiti da postoji posebni sistem<br />

nosa~a za vitrifikacione rastvore, i to:<br />

• Open pulled straws<br />

• Flexipet-denuding pipette<br />

• Cryoloop<br />

Njihov zadatak je da smanje zapreminu<br />

vitrifikacionog rastvora da bi se brzina<br />

rashla|ivanja zadr`ala na {to je mogu}e<br />

vi{em nivou i da uzorak koji se vitrifikuje<br />

bude okru`en te~no{}u, a ne gasom.<br />

Vitrifikacija se ne koristi rutinski u<br />

ve}ini IVF - in vitro fertilisation laboratorija.<br />

Jo{ uvek postoji mnogo razlika i varijabila<br />

u vitrifikacionim protokolima, pa su i<br />

rezultati u skladu sa tim.<br />

Ova metoda je jo{ uvek u povoju, a<br />

poslednjih godina dobija na zna~aju i njen<br />

pravi zamah se mo`e o~ekivati u slede}ih<br />

nekoliko godina.<br />

Na kraju da rezimiramo podatke o krioprezervaciji<br />

humanih materijala. Prednosti<br />

vitrifikacije u odnosu na krioprezervaciju<br />

bi bile slede}e:<br />

- direktni kontakt izme|u humanog<br />

materijala i te~nog azota,<br />

- nema kristalizacije,<br />

- kori{}enje visokih koncentracija krioprotektanta<br />

koje omogu}avaju kratko izlaganje,<br />

- brza procedura vitrifikacije i zagrevanja,<br />

- mali volumen vitrifikacionog rastvora,<br />

- cooling rates od 15000 - 30000 stepeni/min,<br />

- minimiziranje osmotskog o{te}enja,<br />

- redukovano vreme krio procedure na 2<br />

- 10 min.,<br />

- jednostavan protokol,<br />

- nepotrebna skupa oprema.<br />

Vitrifikacija huumanih oocita<br />

Kao {to je ve} re~eno, oociti su posebno<br />

osetljivi na formiranje kristala leda, o{te-<br />

}enje lipidnih kapljica, ili citoskeletona.<br />

Osetljivost oocita raste sa njegovim sazrevanjem.<br />

I u slu~ajevima vitrifikacije oocita,<br />

dobijeni rezultati nisu zadovoljavaju}i.<br />

Osmotske promene vezane za vitrifikaciju i<br />

visoke koncentracije krioprotektanta mogu<br />

da budu toksi~ne za }eliju.<br />

Ipak, procenat pre`ivljavanja nakon vitrifikacije<br />

pokazuje sve bolje rezultate,<br />

posebno, upotrebom i uvo|enjem razli~itih<br />

koncentracija i vrsta krioprotektanata. Procenat<br />

pre`ivljavanja je izme|u 70% do 96%.<br />

Kao i u slu~aju klasi~ne krioprezervacije,<br />

ova procedura je od posebnog zna~aja u<br />

slu~ajevima mladih `ena obolelih od karcinoma.<br />

Njihovi oociti mogu da budu<br />

deponovani pre terapija koje o{te}uju tkivo<br />

jajnika, kao {to su radijacija, hemoterapija i<br />

hirurgija.

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!