asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
IV Deo: Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> 285<br />
Faktori koji uti~u na efikasnost procesa<br />
vitrifikacije su slede}i:<br />
- tip i koncentracija krioprotektanta, jer<br />
su gotovo svi krioprotektanti toksi~ni,<br />
- medijum koji se koristi kao bazni medijum,<br />
- temperatura vitrifikacionog rastvora,<br />
- vreme za koje su }elije/tkivo izlo`ene<br />
finalnoj koncentraciji krioprotektanta pre<br />
potapanja u te~ni azot,<br />
- volumen rastvora krioprotektanta koji<br />
okru`uje }elije/tkivo,<br />
- tehni~ka obu~enost embriologa,<br />
- kvalitet i stepen razvoja }elija/tkiva,<br />
- direktni kontakt te~nog azota i vitrifikacionog<br />
rastvora koji sadr`i biolo{ki<br />
materijal mo`e biti izvor kontaminacije.<br />
Protokoli vitrifikacije su jednostavni,<br />
brzi, i relativno jeftini, imaju}i u vidu da<br />
nije potrebna skupa oprema.<br />
Sistem nosa~a<br />
Treba naglasiti da postoji posebni sistem<br />
nosa~a za vitrifikacione rastvore, i to:<br />
• Open pulled straws<br />
• Flexipet-denuding pipette<br />
• Cryoloop<br />
Njihov zadatak je da smanje zapreminu<br />
vitrifikacionog rastvora da bi se brzina<br />
rashla|ivanja zadr`ala na {to je mogu}e<br />
vi{em nivou i da uzorak koji se vitrifikuje<br />
bude okru`en te~no{}u, a ne gasom.<br />
Vitrifikacija se ne koristi rutinski u<br />
ve}ini IVF - in vitro fertilisation laboratorija.<br />
Jo{ uvek postoji mnogo razlika i varijabila<br />
u vitrifikacionim protokolima, pa su i<br />
rezultati u skladu sa tim.<br />
Ova metoda je jo{ uvek u povoju, a<br />
poslednjih godina dobija na zna~aju i njen<br />
pravi zamah se mo`e o~ekivati u slede}ih<br />
nekoliko godina.<br />
Na kraju da rezimiramo podatke o krioprezervaciji<br />
humanih materijala. Prednosti<br />
vitrifikacije u odnosu na krioprezervaciju<br />
bi bile slede}e:<br />
- direktni kontakt izme|u humanog<br />
materijala i te~nog azota,<br />
- nema kristalizacije,<br />
- kori{}enje visokih koncentracija krioprotektanta<br />
koje omogu}avaju kratko izlaganje,<br />
- brza procedura vitrifikacije i zagrevanja,<br />
- mali volumen vitrifikacionog rastvora,<br />
- cooling rates od 15000 - 30000 stepeni/min,<br />
- minimiziranje osmotskog o{te}enja,<br />
- redukovano vreme krio procedure na 2<br />
- 10 min.,<br />
- jednostavan protokol,<br />
- nepotrebna skupa oprema.<br />
Vitrifikacija huumanih oocita<br />
Kao {to je ve} re~eno, oociti su posebno<br />
osetljivi na formiranje kristala leda, o{te-<br />
}enje lipidnih kapljica, ili citoskeletona.<br />
Osetljivost oocita raste sa njegovim sazrevanjem.<br />
I u slu~ajevima vitrifikacije oocita,<br />
dobijeni rezultati nisu zadovoljavaju}i.<br />
Osmotske promene vezane za vitrifikaciju i<br />
visoke koncentracije krioprotektanta mogu<br />
da budu toksi~ne za }eliju.<br />
Ipak, procenat pre`ivljavanja nakon vitrifikacije<br />
pokazuje sve bolje rezultate,<br />
posebno, upotrebom i uvo|enjem razli~itih<br />
koncentracija i vrsta krioprotektanata. Procenat<br />
pre`ivljavanja je izme|u 70% do 96%.<br />
Kao i u slu~aju klasi~ne krioprezervacije,<br />
ova procedura je od posebnog zna~aja u<br />
slu~ajevima mladih `ena obolelih od karcinoma.<br />
Njihovi oociti mogu da budu<br />
deponovani pre terapija koje o{te}uju tkivo<br />
jajnika, kao {to su radijacija, hemoterapija i<br />
hirurgija.