asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
364 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
fiziolo{ka pH vrednost bila ispod 7.5. Ova<br />
ravnote`a zavisi od sastava kori{}enih<br />
medijuma i na nju uti~u temperatura i<br />
atmosferski pritisak. Neki uslovi zahtevaju<br />
6% CO2 u vazduhu da bi se odr`avala<br />
odgovaraju}a pH vrednost.<br />
Pa`ljivo kalibrisani i precizno kontrolisani<br />
CO2 inkubatori su od kriti~nog<br />
zna~aja za uspe{nu in vitro oplodnju. Izbor<br />
izme|u humidifikovanog i nehumidifikovanog<br />
inkubatora zavisi od tipa kori{}enog<br />
tkivnog sistema kulture. Dok je vla`nost<br />
potrebna za standardnu ~etvorodelnu<br />
otvorenu kulturu, upotreba uravnote`ene<br />
humidifikovane dopune mineralnih ulja<br />
dozvoljava upotrebu inkubatora bez vlage.<br />
Suvi inkubatori sa sobom nose manji rizik<br />
od gljivi~ne kontaminacije i lak{i su za<br />
~i{}enje. Inkubator se mora redovno nadgledati,<br />
a o~itavanja sa displeja proveravati<br />
i kalibrisati prema nezavisnim bele{kama<br />
temperature. pH vrednosti treba da se nadgledaju<br />
sondama koje su postavljene u<br />
standardni test sistem kulture.<br />
Unutra{nje zidove i vrata treba jednom<br />
nedeljno prati sterilnom vodom i preporu-<br />
~uje se godi{nja inspekcija i generalno<br />
servisiranje od strane dobavlja~a. Ponovljeno<br />
otvaranje i zatvaranje inkubatora<br />
uti~e na stabilnost okru`enja kulture tkiva.<br />
Upotreba malog stonog mini inkubatora<br />
tokom prikupljanja oocita i manipulacije<br />
poma`e u minimizaciji ometanja skladi{nog<br />
inkubatora. Savremeni mini inkubatori za<br />
IVF - in vitro fertilisation kulturu su predstavljeni<br />
nedavno i projektovani su da prevazi|u<br />
probleme postojanosti i stabilnosti pH vrednosti<br />
i temperature koji se susre}u kod tradicionalnih<br />
sistema sa velikim inkubatorima.<br />
Kvalitet vode<br />
Pouzdan izvor ultra~iste vode je kriti~an<br />
faktor u laboratoriji, naro~ito ako se medi-<br />
jumi pripremaju na licu mesta. Vajmer je<br />
obavio potpunu analizu ne~isto}a koje se<br />
mogu na}i u vodi. Voda kao univerzalni<br />
rastvara~ pru`a medijum za ve}inu<br />
biolo{kih i hemijskih reakcija i podlo`nija<br />
je kontaminaciji od bilo kog drugog rastvara~a.<br />
Povr{inska i podzemna voda je<br />
kontaminirana {irokim opsegom supstanci,<br />
uklju~uju}i |ubriva, pesticide, herbicide,<br />
deterd`ente, industrijske otpadne vode i<br />
otpadne rastvara~e uz sezonska kolebanja<br />
temperature i padavina koja uti~u na nivoe<br />
kontaminacije.<br />
Postoje ~etiri kategorije kontaminanata:<br />
neorganski, rastvorene katjonske i anjonske<br />
vrste, organski, ~esti~ni i mikroorganizmi<br />
kao {to su bakterije, alge, bu| i gljivice.<br />
Hlor, hloramini, polijonski supstrati, ozon i<br />
fluor se mogu dodati vodi tokom procesa<br />
tretmana i moraju se ukloniti iz vode radi<br />
pripremanja medijuma kulture }elija. U<br />
pro~i{}avanju vode je od presudne va`nosti<br />
analiza izvora dolazne vode zbog utvr|ivanja<br />
potrebnih koraka filtracije, a protokoli<br />
za obradu vode treba da budu prilago|eni<br />
regionalnim zahtevima. Sistemi obrade<br />
vode uklju~uju ~esti~nu filtraciju, filtraciju<br />
aktivnim ugljenikom, inverznu osmozu i<br />
elektro-dejonizaciju. Ultraljubi~asti oksidacioni<br />
sistem nakon koga sledi Milli-Q PF<br />
Plus pro~i{}avanje pre finalne filtracije<br />
kroz filter od 0.22 µm za uklanjanje bilo<br />
kakvih ~estica i spre~avanje reverzne bakterijske<br />
kontaminacije iz okru`enja.<br />
Osoblje IVF - in vitro fertilisation laboratorije<br />
treba da bude upoznato sa varijacijama<br />
njihovog izvora vode kao i sa sposobnostima<br />
njihovog sistema za pro~i{}avanje<br />
vode i treba da razvije protokole za postojano<br />
osiguravanje visokokvalitetnih zaliha<br />
ultra~iste vode.<br />
Vajmer je preporu~io slede}i raspored<br />
za odr`avanje vode za sistem koji je koristio