asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
IV Deo: Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> 367<br />
za pripremu spermatozoida i prikupljanje i<br />
pranje oocita. Me|utim, poznato je da<br />
HEPES - (4-(2-hydroxyethyl)-piperazineethanesulfonic<br />
acid) menja aktivnost<br />
jonskog kanala u plazma membrani pa<br />
mo`e biti embriotoksi~an. Zbog toga se<br />
gameti kasnije moraju isprati u medijumu<br />
kulture, koji ne sadr`i HEPES - (4-(2hydroxyethyl)-piperazineethanesulfonic<br />
acid), pre inseminacije. Medijumi koji su<br />
posebno osmi{ljeni za pranje spermatozoida<br />
su, tako|e, komercijalno dostupni.<br />
Tokom 1990-ih godina je veliki broj<br />
istra`ivanja doveo do razja{njenja metaboli~ke<br />
biohemije i molekularnih mehanizama<br />
koji u~estvuju u sazrevanju gameta,<br />
aktivaciji, oplodnji, genomskoj aktivaciji,<br />
deobi, kompakciji i formiranju blastociste.<br />
Zahtevi za hranljivim materijama razlikuju<br />
se tokom svih ovih razli~itih etapa.<br />
Neodgovaraju}i uslovi kulture izla`u<br />
embrione }elijskom stresu koji rezultuje<br />
usporenom deobom, zaustavljanjem deobe,<br />
pogor{anom proizvodnjom energije, neadekvatnom<br />
aktivacijom genoma i transkripcijom<br />
gena. Nakon formiranja blastociste<br />
sledi eksponencijalno pove}anje sinteze<br />
proteina, uz neosintezu glikoproteina, histona<br />
i novih povr{inskih antigena.<br />
Iako specifi~ne potrebe embriona tokom<br />
njihovog preimplantacionog razvoja nisu<br />
potpuno definisane, etapno-specifi~ni i<br />
hemijski definisani medijumi su dostupni<br />
za upotrebu u IVF - in vitro fertilisation sistemima.<br />
Oni imitiraju prirodnu in vivo<br />
situaciju prate}i zna~ajne promene fiziologije<br />
i metabolizma embriona koje se de{avaju<br />
tokom predimplantacionog perioda.<br />
Serum<br />
U po~etku se koristio filtriran maj~inski<br />
serum koji je dodavan u IVF - in vitro fertilisation<br />
medijume kulture. Maj~inski<br />
serum se rutinski tretirao toplotom da bi se<br />
deaktivirali potencijalno {tetni sastojci, ali<br />
je ova procedura mogla da stvori embriotoksi~na<br />
jedinjenja. Albumin iz seruma je<br />
proteinski sastavni deo okru`enja embriona,<br />
on vezuje lipide i mo`e da pomogne u<br />
vezivanju i stabilizaciji faktora rasta. Va`an<br />
je u odr`avanju kvaliteta embriona i<br />
spre~avanju embriona i gameta da se<br />
zalepe za staklene ili plasti~ne povr{ine<br />
olak{avaju}i tako njihovu manipulaciju.<br />
Preparati albumina mogu biti veoma<br />
promenljivog kvaliteta i nedavna razmatranja<br />
o prenosu patogenih agenasa, kao {to<br />
su hepatitis i HIV - human immunodeficiency<br />
virusi i Krojcfeld-Jakobova bolest<br />
krvnim produktima, veoma su ote`ala<br />
pronala`enje pouzdanih izvora humanog<br />
serum albumina.<br />
Danas je ve}ina laboratorija po~ela da<br />
koristi komercijalne gotove preparate.<br />
Rekombinantna <strong>tehnologija</strong> se sada sve<br />
vi{e primenjuje na komercijalnu proizvodnju<br />
izvesnog broja fiziolo{kih proteina, a<br />
rekombinantni ljudski serum albumin<br />
mo`da }e biti dostupan u budu}nosti.<br />
Predstavljeni su medijumi bez seruma<br />
koji koriste zamene kao {to je PVA -<br />
polivinil alkohol i hialuronat. Polivinilalkohol<br />
je sinteti~ki polimer i on je, iako se<br />
pokazalo da poma`e IVF - in vitro fertilisation<br />
kulturu, ne-fiziolo{ko jedinjenje, pa<br />
bilo koji dugoro~ni uticaji ili posledice<br />
mogu ostati neotkriveni du`e vreme.<br />
Hialuronat je glikosaminoglikan prona-<br />
|en u povi{enim nivoima u materici u<br />
vreme implantacije i ljudski embrion<br />
ekspresuje njegov receptor tokom ~itavog<br />
predimplantacionog razvoja. Za njega se<br />
tako|e zna da formira antivirusni i antiimunogeni<br />
sloj oko embriona radi<br />
pove}anja angiogeneze i olak{avanja brze<br />
difuzije transferskog medijuma u viskozno