asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
370 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
Kultura prekobrojnih oocita<br />
Prekobrojni oociti od pacijenata kod<br />
kojih je prikupljen veliki broj oocita se<br />
mogu koristiti za testiranje novog materijala<br />
kulture. Uzgajati bar 6 oocita u kontrolnom<br />
medijumu i najvi{e 4 u probnom<br />
medijumu.<br />
Kultura multipronuklernog embriona<br />
Oociti koji pokazuju abnormalnu oplodnju<br />
prvog dana nakon inseminacije se<br />
mogu koristiti za testiranje novih serija<br />
materijala. Posmatra se i procenjuje svaki<br />
embrion. Razvoj embriona do faze blastociste<br />
se smatra dokazom adekvatnih uslova<br />
kulture.<br />
Sistemi kulture tkiva<br />
Posude koje su uspe{no kori{}ene za in<br />
vitro oplodnju uklju~uju epruvete, ~etvorodelne<br />
posude za kulturu i Petrijeve posude<br />
koje sadr`e mikrokapi medijuma kulture<br />
ispod sloja parafinskog ili mineralnog ulja.<br />
Bez obzira na to koji je sistem upotrebljen,<br />
on mora da bude sposoban da strogo<br />
odr`ava fiksirane stabilne parametre temperature,<br />
pH vrednosti i osmolarnosti.<br />
Humani oociti su izuzetno osetljivi na<br />
kratkotrajno hla|enje in vitro i umerena<br />
sni`enja temperature mogu da izazovu<br />
nepovratni poreme}aj mejotskog deobnog<br />
vretena uz mogu}e rasturanje hromozoma.<br />
Analize embriona dobijenih putem IVF - in<br />
vitro fertilisation su pokazale da je veliki<br />
broj njih hromozomno abnormalan i<br />
mogu}e je da je rasturanje hromozoma izazvano<br />
temperaturom, doprinelo ve}em<br />
broju preklini~kih i spontanih abortusa koji<br />
slede IVF - in vitro fertilisation i intrafalopijski<br />
transfer gameta. Prema tome, va`no je<br />
kontrolisati kolebanje temperature od<br />
trenutka aspiracije folikula i tokom svih<br />
manipulacija oocitima i embrionima<br />
pomo}u zagrejanih mikroskopskih etapa i<br />
grejnih blokova ili platformi.<br />
Dopuna uravnote`enog ulja kao dela<br />
tkivnog sistema kulture donosi specifi~ne<br />
prednosti:<br />
1. Ulje se pona{a kao fizi~ka barijera i<br />
odvaja kapljice medijuma od atmosfere i<br />
vazdu{nih ~estica i patogena;<br />
2. Ulje spre~ava isparavanje i odla`e<br />
difuziju gasa ~ime odr`ava stabilnim pH<br />
vrednost, temperaturu i osmolarnost medijuma<br />
tokom manipulisanja gametima,<br />
{tite}i embrione od zna~ajnih kolebanja<br />
njihove mikrosredine;<br />
3. Ulje spre~ava isparavanje: ovla`eno i<br />
unapred uravnote`eno ulje dozvoljava<br />
upotrebu inkubatora bez ovla`iva~a koji su<br />
lak{i za ~i{}enje i odr`avanje.<br />
Bilo je sugestija da bi ulje moglo da<br />
pobolj{a razvoj embriona tako {to }e iz medijuma<br />
ukloniti toksine rastvorljive u lipidima.<br />
Ulje ima i neka negativna svojstva . Ono<br />
spre~ava slobodnu difuziju metaboli~kih<br />
nusprodukata kao {to je amonijak, a akumuliranje<br />
amonijaka u medijumu kulture je<br />
toksi~no po embrion. Upotreba ulja tako|e,<br />
uti~e na koncentrisanje kiseonika u medijumu<br />
uz rezultuju}e uticaje na osetljivu<br />
ravnote`u metabolizma embriona.<br />
Priprema ulja<br />
Mineralno, parafinsko ili silikonsko ulje<br />
treba da pri isporuci bude sterilno i da ne<br />
zahteva sterilizaciju ili filtraciju. Visoka<br />
temperatura sterilizacije mo`e da bude<br />
{tetna po samo ulje, a procedura mo`e da<br />
oslobodi potencijalne toksine iz kontejnera.<br />
Provo i Her su izvestili da izlaganje mineralnog<br />
ulja direktnoj sun~evoj svetlosti u<br />
trajanju od 4 ~asa rezultuje izuzetnom<br />
embriotoksi~no{}u, pa preporu~uju da se<br />
ulje {titi od svetlosti i tretira kao fotoreaktivno<br />
jedinjenje.
Change language