asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

IV Deo: Asistirana reproduktivna tehnologija 365
za pro~i{}avanje vode za pripremu medijuma:
• Mese~na zamena ugljenih i dubinskih
filtera,
• Nadgledanje hlora na svakih 21 dan,
• Hlorska sanitizacija sistema inverzne
osmoze i elektrodejonizacije dva puta
mese~no,
• Ve`ba sanitizacije sistema inverzne
osmoze i elektrodejonizacije dva puta
mese~no,
• Zamena predtretmanskog pakovanja
inverzne osmoze na svaka tri meseca,
• UV recirkulacija skladi{nog rezervoara,
• Sanitizacija skladi{nog rezervoara sa
NaOH ~etiri puta godi{nje,
• Sanitizacija Milli-Q PF Plus sa NaOH
dva puta mese~no,
• Zamena smolastog pakovanja za
pro~i{}avanje ~etiri puta godi{nje,
• Zamena 0.22 µm finalnog filtera svakog
meseca,
• Nadgledanje silicijuma i ukupnog
organskog ugljenika u finalnom proizvodu
svakodnevno.
Zalihe
Osnovni spisak zaliha je opisan na kraju
ovog poglavlja; ta~no potrebna kombinacija
}e zavisiti od sistema kulture i kori{}enih
tehnika manipulacije. Zalihe za jednokratnu
upotrebu se koriste kad god je to
mogu}e i mora se garantovati stepen netoksi~nosti
kulture, naro~ito posuda kulture,
igala, sistema za prikupljanje i katetera za
aspiraciju oocita i transfer embriona.
Visokokvalitetne staklene pipete za jednokratnu
upotrebu su potrebne za manipulisanje
gametima i embrionima; one
moraju biti potopljene i isprane sterilnom
vodom i sterilisane suvom toplotom pre
upotrebe. Prilikom pripreme za rukovanje
gametima ili embrionima, svaku pipetu
treba pregledati i isprati sterilnim medijumom
da bi se osiguralo da je ~ista i da na
njoj nema ostataka.
Dnevna rutina ~i{}enja
Ukoliko je tokom rada prosut materijal,
o~isti se suvim ubrusom i ne treba se koristiti
deterd`ent i alkohol dok se rukuje oocitima
ili embrionima. Ako je potrebno
koristiti bilo deterd`ent ili alkohol, treba
dozvoliti da pro|e 20 minuta da bi zaostali
tragovi isparili pre uklanjanja oocita ili
embriona iz inkubatora.
Na kraju svakog dana treba:
• Sav otpad iz procedura staviti u
dvostruke vre}e, zape~atiti ih toplotom i
odlo`iti na odgovaraju}e mesto;
• Ukloniti sve dr`a~e pipeta radi pranja i
sterilizacije pre ponovne upotrebe;
• Ponovo zape~atiti i ponovo sterilizovati
kanistere sa pipetama;
• O~istiti flow hood, radne stolove i svu
opremu pranjem sa rastvorom destilovane
vode i 7 X laboratorijskim deterd`entom
posle ~ega sledi brisanje sa 70% metilisanim
alkoholom;
• Pripremiti svako radno mesto ~istim
vre}ama za sme}e, dr`a~ima pipeta i
Pasterovim pipetama za slede}i radni dan.
Proceduure pranja
Ako laboratorija ima sistem za pripremu
ultra~iste vode, posebna pa`nja se mora
obratiti instrukcijama za odr`avanje i hemijsko
~i{}enje. ^isto}a vode je od najve}eg
zna~aja za procedure pranja, a sistem se
treba periodi~no proveravati na prisustvo
organske kontaminacije i endotoksina.
Pipete
1. Nove pipete preko no}i potopiti u
~istu Analar ili Milli-Q vodu proveravaju}i
da su potpuno pokrivene;