asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
366 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
2. Ocediti pipete i isprati ~istom vodom;<br />
3. Ponovo ocediti i osu{iti pri temperaturi<br />
od 100°C u trajanju od 1-2 ~asa;<br />
4. Postaviti ih u ~ist kanister sa vrhovima<br />
napred i sterilisati suvom toplotom u<br />
trajanju od 3 ~asa pri temperaturi od 180°C.<br />
5. Nakon hla|enja, zapisati datum i<br />
koristiti u roku od jednog meseca od sterilizacije.<br />
Predmeti za vi{ekratnu upotrebu,<br />
rukovanje sa rukavicama bez praha<br />
non-powered ispranim u<br />
pro~i{}enoj vodi<br />
1. Potopiti u destilovanu vodu koja<br />
sadr`i 3-5% 7 X;<br />
2. Male predmete staviti u ultrazvu~nu<br />
kadu za ~i{}enje u trajanju od 5-10 minuta;<br />
3. Osam puta isprati destilovanom<br />
vodom pa zatim dva puta u Analar ili Milli-<br />
Q vodi;<br />
4. Osu{iti, zape~atiti u aluminijumsku<br />
foliju, ili dvostruko upakovati u autoklavne<br />
vre}e;<br />
5. Sterilizovati u autoklavu ili suvom<br />
toplotom na temperaturi od 180°C u trajanju<br />
od tri ~asa;<br />
6. Zabele`iti datum sterilizacije i<br />
odlo`iti na ~istom mestu na kome nema<br />
pra{ine.<br />
Tkivni medijumi kulture<br />
Veliki broj nau~nih istra`ivanja i analiza<br />
je primenjen na razvoj medijuma koji }e<br />
uspe{no podupreti rast i razvoj embriona.<br />
Brojne kontrolisane studije su pokazale<br />
zadovoljavaju}u oplodnju i deobu na nizu<br />
jednostavnih i slo`enih medijuma. Metaboli~ki<br />
i nutricionalni zahtevi embriona su<br />
slo`eni i etapno specifi~ni.<br />
Razumevanje metaboli~kih promena<br />
embriona i njihovih zahteva za supstratom<br />
i hranljivim supstancama je dovelo do<br />
velikog napretka proizvodnje medijuma.<br />
Kontrola kvaliteta je veoma va`na u<br />
pripremi medijuma, uklju~uju}i i izvor svih<br />
sastojaka, naro~ito vode, koji moraju da<br />
budu bez endotoksina, sa niskim sadr`ajem<br />
jona i garantovano bez organskih molekula<br />
i mikroorganizama. Svaka serija pripremljenih<br />
medijuma kulture se mora proveriti<br />
na osmolarnost 285 ± 2 mOsm/kg i pH<br />
vrednost 7.35-7.45 i moraju se pre upotrebe<br />
podvrgnuti procedurama kontrole kvaliteta<br />
pomo}u testa pre`ivljavanja spermatozoida<br />
ili mi{jih embriona.<br />
Medijumi kulture mogu brzo da se<br />
promene za vreme skladi{tenja, pa se<br />
posebna pa`nja mora obratiti na uslove<br />
skladi{tenja i preporu~eni datum isteka<br />
roka upotrebe koji je dao proizvo|a~.<br />
Komercijalno pripremljeni i unapred<br />
testirani visokokvalitetni medijumi kulture<br />
se danas mogu kupiti od velikog broja<br />
snabdeva~a iz celog sveta, pa priprema<br />
medijuma za rutinsku upotrebu u laboratoriji<br />
nije neophodna, jer ova ve`ba mo`e<br />
biti skupa kada se uzmu u obzir vreme i<br />
kontrola kvaliteta. Za sada nema ~vrstih<br />
nau~nih dokaza da je neki od ovih medijuma<br />
superiorniji u odnosu na druge u rutinskoj<br />
IVF - in vitro fertilisation, pa izbor<br />
treba da zavisi od okolnosti kao {to su kontrola<br />
kvaliteta i primenjene procedure testiranja<br />
tokom proizvodnje, cena i, naro~ito,<br />
garantovana efikasnost dostave u pogledu<br />
roka trajanja.<br />
Nakon isporuke se medijum mo`e<br />
podeliti na jednake male zapremine tako da<br />
se svaka mo`e koristiti za pripremu i kultivaciju<br />
gameta jednog pacijenta, uklju~uju}i<br />
i pripremu spermatozoida.<br />
Medijumi koji sadr`e HEPES - (4-(2hydroxyethyl)-piperazineethanesulfonic<br />
acid), koji odr`ava stabilnu pH vrednost u<br />
bikarbonatnom sistemu, se mogu koristiti
Change language