asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
274 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
O{te}enja usled zamrzavanja<br />
Smrt }elije usled intracelularnog formiranja<br />
kristala leda i o{te}enja usled pove-<br />
}anog osmolariteta krioprotektanta tokom<br />
hla|enja, su glavni problemi kod krioprezervacije<br />
}elija i spematozoida.<br />
Neke studije su pokazale smanjenje<br />
motiliteta normalnih uzoraka spermatozoida<br />
od 25 - 75 %, nakon krioprezervacije.<br />
Kod oligoasteno-teratozoospermije procenat<br />
motiliteta mo`e biti i ve}i. Epididimalni<br />
i testikularni spermatozoidi su podlo`niji<br />
o{te}enjima od ejakuliranih spermatozoida.<br />
Sposobnost spermatozoida da pre`ive<br />
krioprezervaciju je specifi~na kod svakog<br />
pacijenta i ~ini se da procene fluidnosti<br />
membrane, anizotropije, imaju prediktivnu<br />
vrednost u odnosu na ishod.<br />
O~igledno je da }e vi{i stepen o{te}enja<br />
biti u korelaciji sa smanjenjem fertilnosti.<br />
Za primenu u klini~koj ART - assisted reproductive<br />
technology preporu~uje se da se<br />
uzorci spermatozoida pripremaju swim-up<br />
ili gradijent centifugalnom metodom.<br />
Krioprezervacija testikularnih<br />
spermatozoida<br />
Metoda kultivacije zamrznutih testikularnih<br />
spermatozoida, ili spermatida je tek<br />
nedavno razvijena i razlikuje se od onih<br />
koje se koriste kod ejakuliranih spermatozoida.<br />
Spermatozoidi se dobijaju u malom<br />
broju, sa veoma slabom pokretljivo{}u i u<br />
razli~itim etapama sazrevanja.<br />
Postoji nekoliko tehnika kultivacije<br />
specifi~nih za testikularne spermatozoide<br />
da bi se pobolj{ao motilitet u in vitro<br />
uslovima, nakon odle|ivanja. Izlaganjem<br />
pentoksifilinu stimuli{e se metabolizam<br />
mitohondrija, a na taj na~in i pokretljivost<br />
spermatozoida. Spermatozoidi za koje se<br />
pretpostavlja da se mogu koristiti za fertilizaciju,<br />
se mogu identifikovati primenom<br />
osmoti~kog {oka u hipoosmotskom rastvoru.<br />
Krioprezervacija testikularnog materijala<br />
trebala bi da elimini{e potrebu za ponavljanjem<br />
hirur{kih biopsija. Testikularni<br />
spermatozoidi mogu biti krioprezervirani<br />
za vi{e poku{aja ICSI - intra citoplasmatic<br />
sperm injection, ali prvo moraju da se<br />
o~iste od testikularnog tkiva i ostataka.<br />
Krioprezervaciju spermatozoida u suspenziji<br />
treba izbegavati, jer produkti lize, posle<br />
otapanja, mogu biti toksi~ni.<br />
Iako je broj klini~kih studija sa krioprotektiranim<br />
testikularnim spermatozoidima<br />
ograni~en, potvr|eno je da su rezultati<br />
slabiji u pore|enju sa rezultatima ciklusa<br />
ICSI - intra citoplasmatic sperm injection u<br />
kojima su kori{}eni sve`i uzorci testikularnih<br />
spermatozoida. Trudno}e sa krioprotektiranim<br />
testikularnim spermatozoidima,<br />
uklju~uju}i i one koji su sazreli in vitro<br />
nakon krioprezervacije, su registrovane.<br />
Bezbedna krioprezervacija<br />
spermatozoida<br />
^uvanje zamrznutih spermatozoida<br />
mo`e biti potrebno tokom du`eg perioda,<br />
pa prema tome, dokumentovanje i metode<br />
pripreme moraju biti pa`ljivo kontrolisani.<br />
Pre krioprezervacije bi svi pacijenti trebali<br />
biti pregledani na prisustvo zaraznih<br />
bolesti kao {to su hepatitis A, B, i C i AIDS,<br />
a trebalo bi obaviti i op{ti medicinski pregled,<br />
radi isklju~enja virusnih bolesti, jer postoji<br />
mogu}nost prenosa virusa u te~nom azotu.<br />
Preporu~uje se karantinski period, kada<br />
je to mogu}e, od 6 meseci posle koga sledi<br />
drugi pregled na prisustvo virusa, a pre<br />
nego {to se uzorak deponuje.<br />
Va`an je izbor paljeta u kojima }e se<br />
zale|ivati sperma. Paljete od PVC -<br />
polyvinyl chloride se ne mogu koristiti, ako<br />
su bile sterilisane prozra~ivanjem, jer u tom<br />
slu~aju postaju toksi~ne. Staklene paljete,<br />
PETG - polyethylene terephtalate glycol i<br />
PVC - polyvinyl chloride se mogu polomiti,<br />
ili eksplodirati pri hla|enju ili zagrevanju
Change language