asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
IV Deo: Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> 369<br />
zajedno sa uvo|enjem bilo kog novog<br />
metoda ili upotrebljenog materijala.<br />
Obavljen je jedan broj biolo{kih ispitivanja,<br />
radi detekcije toksi~nosti i suboptimalnih<br />
uslova kulture, kao {to je pre`ivljavanje<br />
humanih spermatozoida, linije<br />
somatskih }elija i kulture mi{jih embriona<br />
iz jedno}elijske ili dvo}elijske faze.<br />
Validnost ispitivanja mi{jih embriona je<br />
dovedena u pitanje kao pouzdano ispitivanje<br />
za ekstrapolaciju u klini~koj IVF - in<br />
vitro fertilisation. Ona pretpostavlja da su<br />
zahtevi za humane i mi{je embrione isti, a<br />
poznato je da ova pretpostavka nije ta~na.<br />
Mi{ji embrion ne mo`e da reguli{e svoju<br />
endogenu metaboli~ku rezervu pre kasne<br />
dvo}elijske etape, sto ne va`i za humane<br />
embrione. Mi{ji embrioni }e se razvijati iz<br />
dvo}elijske etape u velikom broju medijuma<br />
kulture, bez diskriminacije. Nijedan<br />
trenutno dostupan sistem ne mo`e da<br />
garantuje detekciju niskih nivoa<br />
toksi~nosti, ali mo`e pomo}i u identifikaciji<br />
specifi~nih problema.<br />
Nove serije medijuma, ulja, materijala<br />
ili zaliha kori{}enih u sistemu kulture, ako<br />
nisu ranije testirani, treba da budu testirani<br />
pre upotrebe.<br />
U rutinskoj IVF - in vitro fertilisation<br />
kulturi je o~ekivan broj oplodnje >70%, a<br />
stepen deoba >95%. Stepen deoba je va`an<br />
po{to arest u fazi dva pronukleusa ukazuje<br />
na ozbiljan problem. Minimalno 65%<br />
inseminiranih oocita treba da rezultuje<br />
embrionima u deobi drugog dana. Fizi~kohemijska<br />
ograni~enja testiranja kulture<br />
medijuma su, tako|e, veoma va`na.<br />
Osmolarnost mora da bude unutar granica<br />
275-305 mOsm sa ukupnom varijacijom ne<br />
ve}om od 30 mOsm. Vrednost pH mora da<br />
bude unutar granica 7.2-7.5 sa maksimalnom<br />
varijacijom od 0.4 jedinice pH. Ve}e<br />
varijacije bilo kog parametra ukazuju na<br />
lo{u tehnologiju i neadekvatnu kontrolu<br />
tokom proizvodnje {to vodi ka lo{oj reproduktibilnosti.<br />
Plasti~ne posude kulture tkiva su povremeno<br />
bile promenljivog kvaliteta, pa ispiranje<br />
posuda medijumom pre upotrebe<br />
mo`e biti korisna predostro`nost.<br />
Studije su pokazale da ulje mo`e da<br />
stupi u interakciju sa razli~itim plasti~nim<br />
posudama {to uti~e na razvoj embriona.<br />
Kvalitet plastike koja se koristi za kulturu<br />
tkiva mo`e se promeniti i takve promene u<br />
proizvodnji {priceva, filtera i posuda<br />
ponekada mogu da budu embriotoksi~ne.<br />
Ako je osmolarnost kulture niska, veli~ina<br />
embriona se pove}ava u odnosu na<br />
zapreminu citoplazme, a citoplazmi~ni blebovi<br />
se formiraju u cilju kompenzacije i<br />
dostizanja adekvatnog odnosa nukleus -<br />
citoplazma za ulazak u mitozu. Embrion<br />
gubi, ne samo citoplazmu, ve} i mRNK -<br />
messenger ribonucleic acid i proteine koji<br />
su neophodni za dalji razvoj.<br />
PPrreeddlloo``eennaa kkoorriissnnaa rruuttiinnsskkaa<br />
pprroocceedduurraa kkoonnttrroollee kkvvaalliitteettaa uukklljjuu~~uujjee::<br />
Test pre`ivljavanja spermatozoida<br />
Odabrati normalan uzorak ispranih<br />
pripremljenih spermatozoida i proceniti<br />
brojnost, pokretljivost i progresivnost.<br />
Podeliti odabrani uzorak na ~etiri jedaka<br />
dela: dodati materijal za testiranje u dva<br />
dela i istu koli~inu kontrolnog materijala<br />
koji se trenutno koristi u druga dva dela.<br />
Inkubirati jedan kontrolni i jedan probni<br />
uzorak na 37°C i po jedan od svakog na<br />
sobnoj temperaturi. Proceniti svaki uzorak<br />
po brojnosti, pokretljivosti i progresivnosti<br />
nakon 24 do 48 ~asova. Probni i kontrolni<br />
uzorci treba da pokazuju jednako pre`ivljavanje.<br />
Ako postoji bilo kakva sumnja, test<br />
treba ponoviti.
Change language