asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
IV Deo: Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> 195<br />
Analiziraju}i radove pokazalo se da su<br />
uzro~ne veze izme|u stepena aneuploidija i<br />
infertiliteta posledica neadekvatne definicije<br />
mu{ke neplodnosti. Konvencionalna definicija<br />
je bazirana na koncentraciji i pokretljivosti<br />
spermatozoida, koja kod<br />
zna~ajnog dela oligospermi~nih ili, ~ak normospermi~nih<br />
mu{karaca ne odra`ava<br />
pravi status oplodnog potencijala spermatozoida.<br />
Aktivnost kreatin kinaze, nasuprot<br />
tome, bolje prikazuje prose~nu zrelost<br />
spermatozoida u odnosu na zadr`avanje<br />
citoplazme. Podaci o aktivnostima kreatin<br />
kinaze nisu merilo stvarne zrelosti pojedina~nih<br />
spermatozoida zbog velike varijacije<br />
u stepenu zadr`avanja citoplazme.<br />
Relativna frekvencija spermatozoida sa<br />
umanjenom zrelo{}u, koja je va`na u odnosu<br />
na podatke dobijene FISH - fluorescence<br />
in situ hybridization analizama za pojedina~ne<br />
nukleuse spermatozoida je odre|ena<br />
procenjivanjem pojedina~nih spermatozoida<br />
putem imunocitohemije. Veza izme|u<br />
pokretljivosti i morfologije i selektivna<br />
eliminacija dizomi~nih spermatozoida<br />
pomo}u gradijentne selekcije su dobro<br />
dokumentovani zna~ajnim redukcijama<br />
broja spermatozoida sa citoplazmom, kao i<br />
zna~ajnim smanjenjem aktivnosti CK -<br />
kreatin kinaze u gradijentnim talozima.<br />
Tako su objektivni biohemijski podaci<br />
potvrdili pretpostavku koja se odnosi na<br />
vezu izme|u nezrelosti spermatozoida i njihove<br />
umanjene gustine koja je posledica<br />
zadr`avanja citoplazme kod nezrelih spermatozoida.<br />
Zbog toga je u pripremi za asistiranu<br />
reprodukciju, swim-up metod<br />
veoma efikasan u smanjenju dela diploidnosti.<br />
Suprotno ovome, kod smanjenja<br />
dizomije gradijentna selekcija je metoda izbora.<br />
Uloga aneuploidnih spermatozoida sa<br />
neadekvatnim remodeliranjem plazma<br />
membrane, nije bila va`na kod klasi~ne<br />
oplodnje zbog prisustva barijere zone pelucide.<br />
Uvo|enjem ICSI - intra citoplasmatic<br />
sperm injection metode se premo{}ava<br />
konvencionalni proces prirodne selekcije<br />
spermatozoid - zona. Selekcija spermatozoida<br />
pomo}u HA- hyaluronic acid-a pru`a<br />
priliku za oplodnju zrelim spermatozoidima.<br />
Osim toga, upotreba slajdova prevu~enih<br />
sa HA - hyaluronic acid-om dozvoljava<br />
istovremeno testiranje svakog pacijenta i<br />
na udeo zrelih spermatozoida i na ukupan<br />
broj pokretnih zrelih spermatozoida.<br />
Ovi podaci su veoma va`ni kod procenjivanja<br />
parova sa mu{kom neplodno{}u i<br />
kod slu~ajeva idiopatskog steriliteta, kao i<br />
u utvr|ivanju modaliteta asistirane reprodukcije<br />
koji mo`e biti optimalno primenjen<br />
u tretmanu datog para.<br />
Intracitoplazmi~na injekcija sperme sa<br />
testikularnim spermatozoidima je od dodatnog<br />
zna~aja, jer se danas sve ~e{}e primenjuje<br />
u praksi. Osim zrelih spermatozoida,<br />
testikularni uzorci ~esto sadr`e ostatke<br />
}elija i nepo`eljne }elije kao {to su nezreli<br />
spermatozoidi, okrugli spermatidi, spermatociti<br />
i spermatogonije, kao i somatske<br />
}elije, uklju~uju}i i nukleaze Sertolijevih<br />
}elija, crvena krvna zrnca, ostatke seminifernih<br />
tubula, citoplazmu okruglih spermatida<br />
i netaknute Sertolijeve i Leydigove<br />
}elije. Priprema testikularnih uzoraka je<br />
slo`enija od one koja se obavlja kod epididimalnih<br />
spermatozoida. Standardni<br />
metod za izbacivanje spermatozoida iz<br />
seminifernih tubula za kori{}enje u ICSI -<br />
intra citoplasmatic sperm injection je<br />
priprema uzorka dobijenog biopsijom,<br />
razvla~enjem pomo}u igala ili staklenih<br />
slajdova. Spermatozoidi se dobijaju bilo iz<br />
otvorene biopsije ili putem punkcije iglom.
Change language